小鼠脊髓星形胶质细胞分离自脊髓组织；脊髓是细细的管束状的神经结构，位于脊柱的椎管内且被脊椎保护；是源自脑的中枢神经系统延伸部分。中枢神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物中枢神经系统的一部分，在椎管里面，上端连接延髓，两旁发出成对的神经，分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形（蝴蝶型）灰质区，主要由神经细胞构成；在灰质区周围为白质区，主要由有髓神经纤维组成；脊髓是许多简单反射的中枢。脊髓两旁发出许多成对的神经（称为脊神经）分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。脊髓是周围神经与脑之间的通路，也是许多简单反射活动的低级中枢。按脊神经的出入可把脊髓也分为相应的31节，31对脊神经就是由不同的脊椎发出的。神经系统最基本的结构和功能单位是神经元，即神经细胞，其大小和外观在中枢神经系统中差异很大。但都具有胞体和树突、轴突。胞体又叫核周体，内含神经丝、微管、内质网、游离核糖体和一个有明显核仁的核。一些大神经元突起的粗面内质网可用Nissl染色显示，在光镜下是灰蓝色斑块状，称为尼氏小体。树突和轴突是神经元的突起，能在神经元之间传递电冲动，突起的大小和形态各不相同，很难用常规的显微镜鉴别。
产品属性
产品名称 小鼠脊髓星形胶质细胞
组织来源 脊髓组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 小鼠脊髓星形胶质细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 梭形、多角形
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠脊髓星形胶质细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠脊髓星形胶质细胞经GFAP免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠脊髓星形胶质细胞采用胰蛋白酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
组织取材与分离纯化前处理：取出生 1‑7 d 小鼠，乙醇消毒处死，冰上快速分离完整脊髓组织，无菌预冷 PBS 反复冲洗，精细剥离脊髓外层脑膜、血管及外周神经附属组织，剔除血块与坏死组织，将脊髓组织放置于冰浴无菌培养皿中，所有器械提前高温灭菌，减少微生物污染风险。
组织剪切与酶消化孵育：无菌器械将脊髓剪切成 1 mm³ 组织碎块，去除上清 PBS，加入 37℃预热的胰蛋白酶消化液，37℃水浴消化 12‑18 min，期间间断摇晃混匀，消化末期观察组织呈现松散絮状，立刻加入含血清的完全培养基终止消化，抑制蛋白酶继续损伤细胞膜结构。
机械吹打与细胞悬液过滤：巴氏吸管轻柔反复吹打消化混合物，解离出星形胶质细胞，操作减少气泡产生；混合液先后过 200 目、400 目无菌细胞筛，截留大块组织残渣，收集过滤后的细胞悬液移入无菌离心管。
离心沉淀与初步细胞重悬：800‑1000 r/min 离心 6 min，弃上清废液，加入星形胶质细胞完全培养基充分吹打重悬细胞沉淀，充分打散细胞团，避免细胞聚集成簇，降低后期细胞成团生长的概率。
接种培养与杂细胞去除：细胞计数之后接种至 T75 细胞培养瓶，置于 37℃、5% CO₂培养箱培养；培养 7‑9 d 待细胞铺满瓶底 80%‑90%，密封培养瓶置于恒温摇床，220 r/min，37℃振荡 18 h，通过振荡去除小胶质细胞、神经元等杂细胞，倒掉含杂细胞的培养基。
传代扩增与日常换液管理：使用无菌 PBS 清洗瓶底细胞层，加入胰蛋白酶‑EDTA 消化液，37℃短暂消化 2‑4 min，显微镜下观察细胞回缩变圆，加入完全培养基终止消化，吹打制成单细胞悬液分瓶传代；每 2‑3 天全量或者半量更换新鲜完全培养基，监控细胞形态。
细胞鉴定以及冻存保藏：采用 GFAP 免疫荧光标志物鉴定星形胶质细胞纯度；选取生长状态佳、无污染的对数生长期细胞，配置冻存液分装，程序降温处理后转入液氮罐长期冻存；该细胞可有限传代，尽量控制传代次数，避免细胞表型发生改变。
