小鼠棕色前脂肪细胞分离自棕色脂肪组织；动物体内存在棕色和白色两种脂肪，白色脂肪堆积在皮下，负责储存多余热量；棕色脂肪负责分解引发肥胖的白色脂肪，将后者转化成二氧化碳、水和热量，本身不储存热量。棕色脂肪组织呈棕色，其特点是组织中有丰富的毛细血管，脂肪细胞内散着许多小脂滴，线粒体大而丰富，核圆形，位于细胞中央，这种脂肪细胞也称为多泡脂肪细胞。棕色脂肪组织在成年动物极少，新生儿及冬眠动物较多，在新生儿主要分布在肩胛间区、腋窝及颈后部等处。棕色脂肪组织仅在婴儿时期发挥作用，它们堆积在新生儿肩胛处，帮助维持体温。随着年龄增长，棕色脂肪会逐渐消失。最终，动物体内只残存少量棕色脂肪细胞，分布于颈部和锁骨。脂肪组织在体内含有两种主要的细胞：一种是在胞浆内积聚脂滴的成熟脂肪细胞；另一种是虽未在胞浆内积聚脂滴但有这种潜能的前脂肪细胞。前脂肪细胞呈梭形，有分裂和增殖的能力；成熟的脂肪细胞呈圆形，已经失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化前体细胞，与肥胖有着非常密切的关系。前脂肪细胞是一种类成纤维细胞，在演变的过程中不断吸收脂质，最终成为成熟的脂肪细胞。前脂肪细胞对外界机械损伤的抵抗力较强，可望成为软组织缺损的有益填充物。
产品属性
产品名称 小鼠棕色前脂肪细胞
组织来源 脂肪组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 小鼠棕色前脂肪细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传2-3代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠棕色前脂肪细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠棕色前脂肪细胞经成脂诱导功能验证，诱导成脂后，经油红O定性检测阳性，成脂染色数占比>60%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠棕色前脂肪细胞采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
复苏前全套准备：37℃水浴预热棕色前脂肪细胞专用完全培养基，准备无菌离心管、培养瓶、PBS 缓冲液、胰酶消化液，超净台紫外灭菌 30min，核对冻存管标签；前脂肪细胞对培养条件敏感，确认培养基组分完好，无浑浊污染，调试培养箱。
冻存细胞水浴解冻：取出液氮冻存管，快速投入 37℃水浴，轻柔晃动冻存管，1‑1.5min 融化冻存液，仅剩微小冰晶，75% 酒精擦拭冻存管外壁，带入超净台，缩短室温暴露时间，降低细胞凋亡风险。
稀释离心去除 DMSO：将细胞悬液缓慢滴入装有预温完全培养基的 15mL 离心管，轻柔吹打混匀，800r/min 离心 6min，离心结束，小心弃除上清液，冻存保护剂去除干净，保护底部细胞沉淀。
重悬细胞接种铺瓶：加入棕色前脂肪细胞完全培养基，温和吹打细胞沉淀，制备单细胞悬液，计数后按照标准密度接种 T25 培养瓶，十字摇晃培养瓶，细胞均匀分布瓶底。
培养箱静置孵育贴壁：放入 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱静置孵育，24‑48h 不要挪动培养瓶，前脂肪细胞需要稳定环境完成贴壁。
换液与细胞状态观察：复苏 24h 后首次换液，吸弃旧培养基，去除悬浮死亡细胞，加入预热新鲜培养基；每 2‑3 天换液，显微镜观察梭形前脂肪细胞形态，注意不要诱导提前脂滴分化，监控污染。
传代消化收集细胞：细胞汇合 70‑75% 进行传代，弃培养基，PBS 洗涤，胰酶消化，镜下细胞收缩变圆，完全培养基终止消化，收集细胞离心重悬分瓶；未诱导分化前及时传代，细胞汇合过高会自发出现脂滴，影响实验。
