小鼠棕色脂肪干细胞分离自棕色脂肪组织；动物体内存在棕色和白色两种脂肪，白色脂肪堆积在皮下，负责储存多余热量；棕色脂肪负责分解引发肥胖的白色脂肪，将后者转化成二氧化碳、水和热量，本身不储存热量。棕色脂肪组织呈棕色，其特点是组织中有丰富的毛细血管，脂肪细胞内散着许多小脂滴，线粒体大而丰富，核圆形，位于细胞中央，这种脂肪细胞也称为多泡脂肪细胞。棕色脂肪组织在成年动物极少，新生儿及冬眠动物较多，在新生儿主要分布在肩胛间区、腋窝及颈后部等处。棕色脂肪组织仅在婴儿时期发挥作用，它们堆积在新生儿肩胛处，帮助维持体温。随着年龄增长，棕色脂肪会逐渐消失。最终，动物体内只残存少量棕色脂肪细胞，分布于颈部和锁骨。脂肪干细胞（ADSCs）是一种具有多向分化潜能的干细胞，主要恢复组织细胞的修复功能，促进细胞的再生，恢复年轻面容的同时，身体机能也得到充分改善，有效改善亚健康、早衰等疾病，由内而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干细胞具有很多优点：①具有自我更新及多向分化的潜能；②来源充足；③对供区的创伤较小；④获得率及体外扩增速率高。脂肪干细胞是目前被广泛应用于组织工程领域中理想的种子细胞。
产品属性
产品名称 小鼠棕色脂肪干细胞
组织来源 脂肪组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 小鼠棕色脂肪干细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传2-3代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠棕色脂肪干细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠棕色脂肪干细胞经CD29或CD44免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠棕色脂肪干细胞采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
复苏前期准备工作：37℃水浴预热棕色脂肪干细胞完全培养基，准备无菌离心管、培养瓶、PBS 缓冲液、胰酶消化液，超净台紫外消毒半小时，核对冻存干细胞标签；干细胞容易自发分化，确认培养基无变质污染，培养箱参数稳定。
冻存干细胞水浴解冻：取出液氮冻存管，快速置于 37℃水浴，轻柔晃动冻存管，1‑1.5min 融化冻存液，留存少量冰晶，75% 酒精擦拭管外壁，移入超净工作台，最大限度缩短室温暴露，减少干细胞凋亡与异常分化。
稀释离心去除冻存保护剂：将细胞悬液缓慢滴加到含有预温完全培养基的 15mL 离心管，轻柔混匀，850r/min 离心 5min，离心完毕，小心弃除上清，DMSO 会诱导干细胞分化，上清尽量去除干净，不触碰底部细胞沉淀。
重悬制备单细胞悬液接种：加入棕色脂肪干细胞完全培养基，轻柔吹打沉淀，制备均匀单细胞悬液，计数后按照推荐密度接种 T25 培养瓶，十字摇匀，细胞均匀铺于瓶底。
培养箱恒温静置孵育：放入 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱孵育，48h 内不移动培养瓶，给干细胞充足贴壁时间，维持干细胞原始状态。
换液和干细胞状态监测：复苏 24h 后更换新鲜预热培养基，清除悬浮死亡细胞；每 2‑3 天换液，显微镜观察干细胞成纤维样形态，留意是否出现自发脂滴分化，严格排查微生物污染。
传代消化收获细胞：细胞汇合 70‑80% 开展传代，弃培养基，PBS 清洗瓶壁，胰酶消化，镜下细胞离散收缩变圆，完全培养基终止消化，收集细胞离心重悬分瓶扩增；控制传代次数，高代干细胞干性下降，不建议用于诱导分化实验。
