小鼠棕色脂肪细胞分离自棕色脂肪组织；动物体内存在棕色和白色两种脂肪，白色脂肪堆积在皮下，负责储存多余热量；棕色脂肪负责分解引发肥胖的白色脂肪，将后者转化成二氧化碳、水和热量，本身不储存热量。棕色脂肪组织呈棕色，其特点是组织中有丰富的毛细血管，脂肪细胞内散着许多小脂滴，线粒体大而丰富，核圆形，位于细胞中央，这种脂肪细胞也称为多泡脂肪细胞。棕色脂肪组织在成年动物极少，新生儿及冬眠动物较多，在新生儿主要分布在肩胛间区、腋窝及颈后部等处。棕色脂肪组织仅在婴儿时期发挥作用，它们堆积在新生儿肩胛处，帮助维持体温。随着年龄增长，棕色脂肪会逐渐消失。最终，动物体内只残存少量棕色脂肪细胞，分布于颈部和锁骨。脂肪细胞分为白色脂肪细胞和褐色（棕色）脂肪细胞，常呈白色，在婴幼儿期大量增殖，到青春期数量达到巅峰，此后数量一般不再增加。细胞内含有大量富含脂肪的小泡，称为脂质泡，富含光面内质网。此外，还有一种褐色脂肪细胞，在动物体内主要存在于肩胛骨间、颈背部、腋窝、纵隔及肾脏周围，含有高度团缩的褐色脂肪，作用是将脂质分解产热，调节体内脂质比例。
产品属性
产品名称 小鼠棕色脂肪细胞
组织来源 脂肪组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）
培养基： 小鼠棕色脂肪细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 梭形、多角形、圆形
传代比例： 不传代
传代特性： 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠棕色脂肪细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠棕色脂肪细胞经油红O定性检测阳性，成脂染色数占比>60%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠棕色脂肪细胞采用胶原酶-胰酶联合消化法获得前脂肪细胞，经成脂诱导培养基诱导培养制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
复苏实验前期筹备：37℃水浴预热棕色脂肪细胞完全培养基，准备无菌离心管、培养瓶、PBS 缓冲液、低浓度胰酶消化液，超净台紫外灭菌；成熟棕色脂肪细胞内含脂滴，细胞较为脆弱，核对冻存管标签，仔细检查全部试剂无浑浊污染。
冻存细胞水浴快速融化：取出液氮冻存管，投入 37℃水浴轻柔晃动，1min‑1.5min 融化冻存液，留有微量冰晶，75% 酒精擦拭冻存管外壁，带入超净台，严格控制室温暴露时长，脂滴细胞极易受温度变化损伤。
稀释离心去除 DMSO 保护剂：将细胞悬液缓慢滴入装有预温完全培养基的 15mL 离心管，轻柔颠倒混匀，降低吹打力度，800r/min 离心 6min，离心结束，小心弃除上清液，充分去除冻存保护剂，操作轻柔避免脂滴破裂。
温和重悬细胞接种铺瓶：加入棕色脂肪细胞完全培养基，极轻柔吹打细胞沉淀，禁止剧烈吹打造成脂滴破裂细胞死亡，制备单细胞悬液，计数后低密度接种 T25 培养瓶，缓慢十字摇匀培养瓶。
培养箱静置孵育贴壁：平稳放入 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱静置孵育，48h 之内禁止挪动培养瓶，成熟棕色脂肪细胞贴壁能力弱，需要极其稳定培养环境。
换液操作与细胞观察：复苏 48h 后轻柔换液，缓慢吸弃旧培养基，避免吸走贴壁不牢的脂肪细胞，加入预热新鲜培养基；每 2‑3 天换液，显微镜观察胞内多房脂滴的棕色脂肪细胞特征，监控细胞漂浮死亡情况。
实验收获处理：该细胞增殖能力极弱，不适合多次传代；细胞状态稳定后直接用于后续实验；如需收集细胞，使用低浓度胰酶短时间消化，及时终止消化，低速离心收集细胞，避免脂滴破裂，不建议反复传代扩增。
