小鼠子宫成纤维细胞分离自子宫组织；子宫是孕育胎儿的器官，位于盆腔中部，膀胱与直肠之间，其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持，这些结构受损或松弛时，可以引起子宫脱垂。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的子宫成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6 h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。子宫成纤维细胞的主要特征：①是子宫的重要细胞组成，在体外易于培养；②在子宫损伤后能修复和重塑子宫；③在子宫炎症时能有效控制炎症扩散。
产品属性
产品名称 小鼠子宫成纤维细胞
组织来源 子宫组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 小鼠子宫成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠子宫成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠子宫成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠子宫成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
复苏前试剂耗材筹备：37℃水浴预热子宫成纤维细胞完全培养基，准备无菌离心管、T25 培养瓶、PBS 缓冲液、胰酶‑EDTA 消化液，超净台紫外灭菌 30min，核对冻存管标签，检查所有试剂无浑浊沉淀，确认细胞培养箱运行正常。
冻存细胞水浴解冻操作：从液氮罐取出冻存管，快速放入 37℃水浴，持续轻柔晃动冻存管，1‑2min 完成冻存液融化，仅剩微小冰晶，取出冻存管，75% 酒精擦拭外壁，移入超净工作台，缩短室温暴露时间。
稀释离心去除 DMSO 冻存保护剂：将管内细胞悬液缓慢滴加到装有预温完全培养基的 15mL 离心管，轻柔吹打混匀，850r/min 离心 5min，离心结束，小心弃去上层上清，充分去除 DMSO，保护底部细胞沉淀。
重悬单细胞悬液接种铺瓶：加入子宫成纤维细胞完全培养基，温和吹打细胞沉淀，制备均匀单细胞悬液，细胞计数后按照标准密度接种 T25 培养瓶，十字摇晃培养瓶，使细胞均匀分布瓶底。
培养箱静置孵育贴壁：平稳放入 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱静置孵育，24h 内减少挪动培养瓶，成纤维细胞贴壁较快，稳定环境利于细胞伸展生长。
换液处理以及细胞观察：复苏 24h 后进行首次换液，吸弃旧培养基，清除悬浮死亡细胞，加入预热新鲜培养基；每 2‑3 天更换培养基，显微镜观察典型长梭形成纤维细胞形态，监控污染情况。
传代消化收集细胞：细胞汇合 75‑85% 开展传代，弃旧培养基，PBS 洗涤细胞，加入胰酶消化，镜下细胞收缩变圆，立刻加入完全培养基终止消化，收集细胞悬液离心，重悬分瓶扩增；该细胞增殖快，及时传代，防止细胞老化。
