3004901493@qq.com 021-39596320
小鼠肌源性干细胞

小鼠肌源性干细胞

货号:
产品规格:
价格:
7,780.00
库存: 20
数量:
说明书下载 收藏: 0
产品概述 product description

小鼠肌源性干细胞分离自肌肉组织;肌源性干细胞(MDSCs)属于成体多能干细胞,具有多细胞系分化和自我更新能力。通过诱导刺激,MDSCs可以分化为脂肪、骨骼、软骨、平滑肌和神经细胞等多种细胞和组织类型;作为基因治疗和组织工程的供体细胞,已成为治疗心肌梗死、Duchenne氏肌营养不良等疾病的研究热点;近年来,肌源性干细胞在治疗尿失禁等方面的应用逐步得到重视。需注意的是,肌源性干细胞主要存在于骨骼肌组织中,只是成熟组织的很少部分细胞;平时处于静止状态,在细胞应激和组织缺失时才会激活;并且随着年龄的增加,所含细胞数量逐渐减少,而目前临床疾病的治疗主要是针对成体进行。肌源性干细胞的体外扩增对细胞移植和干细胞介导的基因治疗至关重要。对肌源性干细胞的扩增研究发现,EGF、FGF-2和SCF可以通过减数分裂或促使不分裂细胞进入有丝分裂周期,从而刺激细胞增生。更重要的是,细胞因子诱导的体外扩增可以通过自我更新不刺激细胞分化,从而保持干细胞表型。

产品属性

产品名称 小鼠肌源性干细胞

简称 MSC

组织来源 骨骼肌组织

默认种属 昆明小鼠,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)

培养基: 小鼠肌源性干细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 每2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 成纤维细胞样

传代比例: 1:2

传代特性: 可传2-3代

消化液: 0.25%胰蛋白酶

小鼠肌源性干细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的小鼠肌源性干细胞经Sca-1免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的小鼠肌源性干细胞采用胶原酶-中性蛋白酶-胰蛋白酶联合消化法结合密度梯度离心、差速贴壁法,最后通过肌源性干细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

无菌准备:超净台紫外消毒 30min,肌源性干细胞专用完全培养基、PBS、胰酶消化液,37℃水浴预热;T25 培养瓶、离心管,做好标记。

冻存细胞复苏:冻存管 37℃水浴快速融化,酒精擦拭管壁移入超净台,细胞悬液缓慢滴入干细胞完全培养基离心管轻柔混匀。

离心去除冻存保护剂:300g 室温离心 6min,小心吸弃上清,不要扰动干细胞沉淀。

重悬铺瓶:加入肌源性干细胞完全培养基,轻柔吹打打散细胞团,活细胞计数,接种 T25 培养瓶,晃动培养瓶使细胞均匀分布瓶底。

孵育培养:置于 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱静置孵育,复苏 48h 尽量不挪动培养瓶,利于干细胞贴壁活化。

换液去除杂细胞:48h 后首次换液,吸除旧培养基,PBS 轻柔漂洗细胞层,去除悬浮血细胞、碎片,补入新鲜完全培养基,每 2‑3 天换液,观察干细胞克隆增殖。

消化传代收获:细胞汇合 70‑80%,弃培养基,PBS 清洗,胰酶消化,镜下细胞变圆脱落,培养基终止消化;离心收集细胞,用于肌组织修复、多向分化实验。