小鼠脾淋巴细胞分离自脾脏组织；脾脏是机体最大的免疫器官，占全身淋巴组织总量的25%，含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞，是机体细胞免疫和体液免疫的中心。位于左季肋区后外方肋弓深处，与9-11肋相对，长轴与第10肋一致。膈面与膈肌和左肋膈窦相邻，前方有胃，后方与左肾、左肾上腺毗邻，下端与结肠脾沟相邻，地柔软的网状内皮细胞器官。淋巴细胞（lymphocyte）白细胞的一种，由淋巴器官产生，机体免疫应答功能的重要细胞成分。淋巴器官根据其发生和功能的差异，可分为中枢淋巴器官（又名初级淋巴器官）和周围淋巴器官（又名次级淋巴器官）两类。前者包括胸腺、腔上囊或其相当器官（有人认为在哺乳动物是骨髓）。它们无须抗原刺激即可不断增殖淋巴细胞，成熟后将其转送至周围淋巴器官。后者包括脾、淋巴结等。成熟淋巴细胞需依赖抗原刺激而分化增殖，继而发挥其免疫功能。
产品属性
产品名称 小鼠脾淋巴细胞
简称 SPL
组织来源 脾脏
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 小鼠脾淋巴细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 悬浮
细胞形态： 圆形
传代比例： 不传代
传代特性： 不增殖；不传代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠脾淋巴细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠脾淋巴细胞，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠脾淋巴细胞采用机械研磨法结合密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
复苏准备：小鼠脾淋巴细胞专用完全培养基、无菌 PBS，准备 15mL 离心管，淋巴细胞对胰酶不依赖，无需胰酶消化液，试剂 37℃水浴回温，超净台紫外灭菌 30min，备好无菌耗材，检查冻存管完好。
冻存管水浴解冻：液氮取出冻存管，快速浸入 37℃水浴，轻晃 1‑2min，大部分冰晶融化，残留微小冰屑即可取出，75% 酒精擦拭管壁，移入超净工作台。
稀释离心除冻存剂：无菌打开冻存管，细胞悬液缓慢滴加到装有 4mL 预热淋巴细胞完全培养基的离心管，轻柔吹打混匀，1000r/min 离心 5min，沉降悬浮淋巴细胞，去除 DMSO 冻存上清。
重悬接种铺瓶：离心完毕弃上清，加入 2mL 脾淋巴细胞完全培养基，轻柔吹打重悬细胞沉淀，打散细胞团，淋巴细胞为悬浮细胞，将悬液转移至 T25 培养瓶，补加培养基，轻轻晃动混匀细胞。
恒温箱静置孵育：培养瓶平稳放置于 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，静置孵育 24h，悬浮细胞，不需要贴壁，避免剧烈摇晃。
换液镜检：24h 后收集瓶内全部细胞悬液，离心弃旧培养基，PBS 轻洗细胞沉淀，加入预热新鲜完全培养基重悬，回种培养瓶，放回培养箱，每日镜检细胞活率，排查微生物污染。
传代扩增：细胞密度升高后，收集全部细胞悬液，细胞计数，离心，用新鲜完全培养基重悬，按照合适细胞密度分瓶继续悬浮培养，不进行胰酶消化操作。
