小鼠皮肤肥大细胞分离自皮肤组织；皮肤肥大细胞广泛分布于皮肤微血管周围，分泌多种细胞因子，参与免疫调节（T细胞、B细胞、APC细胞活化）。皮肤肥大细胞表达MHC分子、B7分子，具有APC功能。表达大量的IgE-Fc受体，释放过敏介质。具有弱吞噬功能，和血液的嗜碱粒细胞同样，具有强嗜碱性颗粒的组织细胞。存在于血液中的这类颗粒，含有肝素、组织胺、5-羟色胺，由细胞崩解释放出颗粒以及颗粒中的物质，可在组织内引起速发型过敏反应（炎症）。由于在肥大细胞上结合的IgE抗体和抗原的接触，使细胞多陷于崩坏。肥大细胞呈圆形或卵圆形，细胞核小，呈圆形或椭圆形，染色浅，位于细胞中央。细胞常成堆或单个分布于血管附近。细胞呈圆形或卵圆形，细胞质中充满大小一致、染成蓝紫色的颗粒，均匀分布在核周围。
产品属性
产品名称 小鼠皮肤肥大细胞
组织来源 皮肤组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 小鼠皮肤肥大细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 悬浮
细胞形态： 圆形
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠皮肤肥大细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠皮肤肥大细胞经CD117免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠皮肤肥大细胞采用胶原酶-胰蛋白酶混合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
复苏准备：小鼠皮肤肥大细胞专用完全培养基、无菌 PBS、温和消化工作液 37℃水浴回温，超净台紫外照射 30min 灭菌，准备 T25 培养瓶、15mL 离心管、无菌枪头耗材，核对冻存管编号，确认无漏液破损。
水浴解冻冻存管：从液氮罐取出冻存管，浸入 37℃温水，轻柔摇晃冻存管 1‑2min，大部分冰晶融化，留有少量冰屑即可拿出，酒精擦拭管壁，移入超净台。
稀释离心去除冻存保护剂：无菌拧开冻存管，细胞悬液缓慢滴入装有 4.5mL 预热完全培养基的离心管，轻柔吹打混匀，1000r/min 离心 5min，沉降活细胞，弃去含 DMSO 上层冻存上清。
重悬细胞接种：倒掉离心上清，加入 2mL 皮肤肥大细胞完全培养基，轻柔吹打重悬管底沉淀，打散细胞团块，肥大细胞部分悬浮生长，不要过度吹打，细胞悬液转移至 T25 培养瓶，补加足量培养基，轻晃培养瓶混匀。
培养箱静置孵育：培养瓶平稳放入 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，静置培养 24h，减少挪动，兼顾贴壁与悬浮细胞存活。
换液观察状态：24h 后取出培养瓶，收集瓶内全部细胞悬液离心，弃旧培养基，PBS 轻洗沉淀，更换预热新鲜完全培养基，回种至培养瓶，每日显微镜观察细胞颗粒形态，检查污染。
传代扩增：细胞密度达到适宜浓度，收集全部细胞悬液离心，弃上清，加入新鲜完全培养基重悬，按细胞计数结果分瓶，肥大细胞以悬浮为主，避免强力胰酶长时间消化。
