小鼠皮层神经元细胞分离自脑皮层组织；皮层神经元细胞是构成中枢神经系统结构和功能的基本单位。神经元是具有长突触（轴突）的细胞，它由细胞体和细胞突起构成。在长的轴突上套有一层鞘，组成神经纤维，它的末端的细小分支叫做神经末梢。细胞体位于脑、脊髓和神经节中，细胞突起可延伸至全身各器官和组织中。细胞体是细胞含核的部分，其形状大小有很大差别，直径约4-120微米。核大而圆，位于细胞中央，染色质少，核仁明显。细胞质内有斑块状的核外染色质，还有许多神经元纤维。细胞突起是由细胞体延伸出来的细长部分，又可分为树突和轴突。每个神经元可以有一或多个树突，可以接受刺激并将兴奋传入细胞体。每个神经元只有一个轴突，可以把兴奋从胞体传送到另一个神经元或其他组织，如肌肉或腺体。皮质神经元是大脑皮质的主要组成细胞之一，是大脑进行功能活动调节的基本单位，参与动物多种中枢神经系统疾病的病理过程。通过形态学观察显示神经元从贴壁、伸出突起开始；突起逐渐增多，而后突起进一步增多并逐渐成网，同时细胞胞体增大，周边光晕明显。10-12 d细胞最为丰满，随后神经元开始裂解，突起逐渐减少，细胞已退化变性，轮廓模糊，光晕消失，细胞变形。
产品属性
产品名称 小鼠皮层神经元细胞
组织来源 脑组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）
培养基： 小鼠皮层神经元细胞完全培养基(含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 神经元细胞样
传代比例： 不传代
传代特性： 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群
消化液： 0.125%胰蛋白酶
小鼠皮层神经元细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠皮层神经元细胞经β-Tubulin-Ⅲ免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠皮层神经元细胞采用胰蛋白酶消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
复苏准备：皮层神经元细胞专用完全培养基、无菌 PBS，神经元对胰酶敏感，提前备好无血清消化工作液，37℃水浴回温全部试剂，超净台紫外消毒 30min，准备多聚赖氨酸包被好的 T25 培养瓶、15mL 离心管、无菌耗材，检查冻存管完好。
冻存管水浴解冻：液氮取出冻存管，快速置于 37℃水浴，轻柔晃动 1‑2min，大部分冰晶融化，残留少量冰屑即可取出，75% 酒精擦拭管壁，移入超净工作台。
稀释离心：无菌打开冻存管，细胞悬液缓慢滴加到装有 4mL 预热神经元完全培养基的离心管，轻柔吹打混匀，800r/min 低速离心 6min，神经元脆弱，降低转速减少细胞损伤，弃去冻存上清。
重悬接种铺瓶：离心结束弃上清，加入 2mL 皮层神经元完全培养基，极轻柔吹打重悬细胞沉淀，严禁剧烈吹打损伤神经元，将细胞悬液转移至多聚赖氨酸包被 T25 瓶，补加培养基，缓慢晃动培养瓶，使细胞均匀分布。
恒温孵育贴壁：培养瓶平稳放入 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，静置孵育 24h，绝对不要挪动摇晃，神经元贴壁脆弱，晃动会造成大量细胞漂浮死亡。
半量换液镜检：24h 后，只吸出一半旧培养基，补入同等体积预热新鲜神经元完全培养基，不进行 PBS 冲洗，防止冲掉贴壁神经元，放回培养箱，每日镜检神经元突起生长状态，排查污染。
传代处理：原代皮层神经元分化后很难传代；若为复苏后扩增，汇合合适时，使用神经元专用温和消化液短暂消化，立刻加培养基终止，低速离心收集细胞，接种至新包被培养瓶，全程操作力度轻柔。
