小鼠膀胱移行上皮细胞分离自膀胱组织；膀胱是一个储尿器官，在哺乳类动物，它是由平滑肌组成的一个囊形结构，位于骨盆内，其后端开口与尿道相通。膀胱与尿道的交界处有括约肌，可以控制尿液的排出。膀胱壁由三层组织组成，由内向外为黏膜层、肌层和外膜。膀胱内表面黏膜层的上皮细胞均为移行上皮细胞，所以膀胱黏膜上皮又叫膀胱移行上皮。肌层由平滑肌纤维构成，称为逼尿肌，逼尿肌收缩，可使膀胱内压升高，压迫尿液由尿道排出。在膀胱与尿道交界处有较厚的环形肌，形成尿道内括约肌。在括约肌收缩能关闭尿道内口，防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分为三层：即浆膜层（蜂窝脂肪组织）、肌肉层（逼尿肌、膀胱三角区肌）和黏膜层（极薄的一层移行上皮组织）。其主要作用有：①组成过滤屏障内壁的重要部分；②在炎症和致血栓物质的刺激合成必要的生物活性分子；③受损后影响系膜细胞和上皮细胞，进而影响肾脏病变。
产品属性
产品名称 小鼠膀胱移行上皮细胞
组织来源 膀胱组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： 鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）
培养基： 小鼠膀胱移行上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 上皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠膀胱移行上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠膀胱移行上皮细胞经Cytokeratin-AE1/AE3免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠膀胱移行上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
复苏准备：膀胱移行上皮细胞专用完全培养基、PBS 缓冲液、0.25% 胰蛋白酶‑EDTA 消化液 37℃水浴回温，超净工作台紫外消毒 30min，准备 T25 培养瓶、15mL 离心管、无菌枪头等耗材，核对冻存管，确认完好无漏液。
水浴快速解冻冻存管：从液氮取出冻存管，浸入 37℃温水，轻柔摇晃冻存管 1‑2min，大部分冰晶融化，仅留少量冰屑即可取出，酒精擦拭管壁，移入超净台。
稀释离心去除 DMSO：无菌拧开冻存管，细胞悬液缓慢滴入装有 4.5mL 预热完全培养基的离心管，轻柔吹打混匀，1000r/min 离心 5min，沉降活细胞，弃去上层冻存上清。
重悬接种铺瓶：倒掉离心上清，加入 2mL 膀胱移行上皮细胞完全培养基，轻柔吹打重悬管底细胞沉淀，打散细胞团块，悬液转移至 T25 培养瓶，补加培养基，多角度晃动培养瓶，细胞均匀铺在瓶底。
静置孵育贴壁：培养瓶平稳放置于 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，静置孵育 24h，减少挪动，帮助上皮细胞贴壁生长。
换液清除死细胞：培养 24h 后取出培养瓶，吸弃旧培养基，PBS 轻柔冲洗细胞层，去除漂浮死细胞、细胞碎片，更换预热新鲜完全培养基，放回培养箱，每日显微镜观察细胞形态，检查污染情况。
传代扩增：细胞汇合度 75‑80%，弃培养基，PBS 清洗细胞层 2 次，加入胰酶消化液，37℃孵育 1‑3min，镜下细胞收缩变圆，加入完全培养基终止消化，吹打收集全部细胞悬液，离心，按比例分瓶传代。
