小鼠脑微血管周细胞分离自脑微血管；大脑分左右两个半球，大脑皮质（灰质）覆盖着每个大脑半球的大部分，它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面，即外侧面（约占整个皮质面积的1/3）、内侧面和底面（占2/3的面积）；半球表面有很多深浅不等的沟或裂，沟或裂之间的隆起叫回，它们大大增加了大脑的表面积；大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔，使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。周细胞（pericyte）又称Rouget细胞和壁细胞，是一种包围全身毛细血管和静脉中内皮细胞的细胞，可以收缩。周细胞嵌入毛细血管内皮细胞的基膜中，通过物理接触和旁分泌信号与内皮细胞进行细胞通讯，监视和稳定内皮细胞的成熟过程。此外，周细胞还具有调控毛细血管血流量、细胞碎屑清除和吞噬以及血脑屏障渗透性的作用，其多功能性是目前研究的热点之一，所以对血管周细胞的生物学特征、标记物、细胞功能等的研究都为相关研究提供基础资料。周细胞产生手指状的外延以调控毛细血管的血流量。周细胞和内皮细胞之间共同拥有一个基膜，基膜上有多种细胞连接，包括多种整合素、神经钙黏素、纤连蛋白以及接合素。它还参与毛细血管直径的双向调控；毛细血管受损时，周细胞还可增殖，分化为内皮细胞和成纤维细胞。
产品属性
产品名称 小鼠脑微血管周细胞
组织来源 大脑组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）
培养基： 小鼠脑微血管周细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-3代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠脑微血管周细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠脑微血管周细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠脑微血管周细胞采用中性蛋白酶-胶原酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
复苏准备：脑微血管周细胞完全培养基、PBS 缓冲液、0.25% 胰蛋白酶‑EDTA 消化液置于 37℃水浴回温，超净台紫外照射 30min 灭菌，备好 T25 培养瓶、15mL 离心管、无菌枪头耗材，核对冻存管信息，确认无破损渗漏。
水浴解冻冻存管：从液氮罐取出冻存管，浸入 37℃温水，轻柔摇晃冻存管 1‑2min，大部分冰晶融化，留有少量冰屑即可取出，酒精擦拭管壁，移入超净台。
稀释离心去除冻存剂：无菌拧开冻存管，细胞悬液缓慢滴入装有 4.5mL 预热完全培养基的离心管，轻柔吹打混匀，1000r/min 离心 5min，沉降活细胞，弃去上层含 DMSO 的冻存上清。
重悬接种铺瓶：倒掉离心上清，加入 2mL 脑微血管周细胞完全培养基，轻柔吹打重悬管底细胞沉淀，打散细胞团块，将细胞悬液转移至 T25 培养瓶，补加足量培养基，水平多角度晃动培养瓶，使细胞均匀铺在瓶底。
静置孵育贴壁：培养瓶平稳放入 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，静置孵育 24h，减少挪动，利于周细胞贴壁伸展。
换液清除死细胞：培养 24h 后取出培养瓶，吸弃旧培养基，无菌 PBS 轻柔冲洗细胞层，去除漂浮死细胞、碎片，更换预热新鲜完全培养基，放回培养箱，每日显微镜观察细胞形态，检查污染情况。
传代扩增：细胞汇合度 80‑85%，弃培养基，PBS 清洗细胞层 2 次，加入胰酶消化液，37℃孵育 2‑4min，镜下细胞收缩变圆，加入完全培养基终止消化，吹打收集全部细胞悬液，离心，按比例分瓶传代。
