小鼠脑微血管内皮细胞分离自脑组织；脑微血管内皮细胞是血脑屏障的主要组成成分，它是组成脑微血管腔面单层扁平上皮样细胞，能够限制可溶性物质和细胞等从血液进入大脑，大脑微血管内皮细胞与外周内皮细胞相比具有一些相同特性。它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用，在脑血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。与外周内皮细胞相同，大脑微血管内皮细胞表面表达细胞粘附分子，调控白细胞进入大脑。由于微血管内皮细胞的器官特异性，内皮细胞通常取源于疾病研究的相关组织。其主要特征如下：①脑微血管内皮细胞存在许多细胞间紧密连接，产生很高的跨内皮阻抗，延迟细胞旁的通量；②脑微血管内皮细胞缺乏内皮细胞的窗孔结构，其液相物质胞饮水平较低；③脑微血管内皮细胞具有不对称定位酶和载体介导转运系统，从而产生“两极分化”的表现型。
产品属性
产品名称 小鼠脑微血管内皮细胞
简称 BMVECs
组织来源 脑组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）或明胶（0.1%）
培养基： 小鼠脑微血管内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 内皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代；不建议多次传代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠脑微血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠脑微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠脑微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
复苏准备：脑微血管内皮细胞专用完全培养基、无菌 PBS、0.25% 胰酶‑EDTA 消化液 37℃水浴回温，超净台紫外灭菌 30min，准备 T25 培养瓶、15mL 离心管、无菌移液耗材，检查冻存管无开裂漏液。
冻存管解冻：液氮取出冻存管，快速放入 37℃水浴，持续轻晃 1‑2min，大部分冰晶融化，残留少量冰屑即可取出，75% 酒精擦拭管壁，移入超净工作台。
稀释离心：打开冻存管，细胞悬液缓慢滴加到含有 4mL 预热完全培养基的离心管，轻柔吹打混匀，1000r/min 离心 5min，沉降细胞，去除 DMSO 冻存上清。
重悬铺瓶接种：离心结束弃上清，加入 2mL 脑微血管内皮细胞完全培养基，轻柔吹打重悬细胞沉淀，打散细胞团，悬液转移至 T25 培养瓶，补加培养基，多角度轻晃培养瓶实现细胞均匀铺板。
恒温孵育贴壁：培养瓶平稳放入 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，静置孵育 24h，不随意挪动培养瓶，保障微血管内皮细胞贴壁。
换液镜检：24h 后取出培养瓶，吸弃旧培养基，PBS 轻柔漂洗细胞层，清除悬浮死细胞碎片，更换预热新鲜完全培养基，放回培养箱，每日镜检细胞形态，排查污染。
传代操作：细胞汇合度 80%，弃培养基，PBS 清洗细胞 2 次，加入胰酶消化液 37℃消化 1‑3min，镜下细胞收缩变圆，加入完全培养基终止消化，吹打收集细胞，离心，按适宜比例分瓶传代。
