小鼠脑膜细胞分离自脑膜组织；脑膜是颅骨与脑间的隔膜，一共有三层，由外向内为硬脑膜、蛛网膜和软脑膜。脑膜细胞围绕着大脑，参与中枢神经系统的正常发育，能稳定脑软膜表面的细胞外基质、组织放射状胶质细胞网络和小脑皮层分层结构。
产品属性
产品名称 小鼠脑膜细胞
组织来源 脑膜组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 小鼠脑膜细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠脑膜细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠脑膜细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠脑膜细胞采用胰蛋白酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
复苏准备：小鼠脑膜细胞专用完全培养基、PBS 缓冲液、0.25% 胰蛋白酶‑EDTA 消化液 37℃水浴回温，超净工作台紫外照射 30min 完成灭菌，准备 T25 培养瓶、15mL 离心管、无菌枪头等耗材，核对冻存管编号，确认无破损漏液。
快速水浴解冻：取出液氮保存的细胞冻存管，浸入 37℃温水，轻柔摇晃冻存管 1‑2min，大部分冰晶融化，仅留少量冰屑即可取出，75% 酒精擦拭管壁，移入超净台内部。
稀释离心去除冻存保护剂：无菌开启冻存管，将细胞悬液缓慢滴入装有 4‑5mL 预热完全培养基的 15mL 离心管，轻柔吹打充分混匀，1000r/min 离心 5min，沉降活细胞，弃去含有 DMSO 的上层冻存液。
重悬细胞接种：倒掉离心后的上清液体，加入 2mL 脑膜细胞完全培养基，反复轻柔吹打管底细胞沉淀，打散细胞团聚块，将细胞悬液转移至 T25 培养瓶，补加培养基，多角度晃动培养瓶，使细胞均匀铺于瓶底。
培养箱静置贴壁：将培养瓶平稳放置于 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，静置孵育 24h，尽量减少移动，利于脑膜细胞贴壁生长。
换液观察细胞状态：孵育 24h 后取出培养瓶，吸除全部旧培养基，无菌 PBS 轻柔冲洗细胞层，去除悬浮死细胞以及碎片，更换预热新鲜完全培养基，放回培养箱，每日显微镜观察细胞形态，检查有无细菌真菌污染。
传代扩增操作：细胞汇合度到达 75‑80%，弃去瓶内培养基，PBS 洗涤细胞层 2 次，加入胰酶消化液，37℃消化 2‑4min，显微镜下看到细胞收缩变圆，立刻加入完全培养基终止消化，吹打收集全部细胞悬液，离心，按照合适比例分瓶传代继续培养。
