3004901493@qq.com 021-39596320
小鼠脑静脉血管内皮细胞

小鼠脑静脉血管内皮细胞

货号:
产品规格:
价格:
7,780.00
库存: 20
数量:
说明书下载 收藏: 0
产品概述 product description

小鼠脑静脉血管内皮细胞分离自脑静脉组织;与脑动脉相比,脑静脉管壁较薄。与身体其他部位的静脉不同,脑静脉管壁中没有静脉瓣,静脉血的回流依赖高位的势能。脑静脉血的回流路径可以归纳为:大部脑静脉血经脑深部静脉和脑血窦流入颈内静脉医|学教育网搜集整理;小部脑静脉血经眼部翼状静脉丛,进入静脉导血管再到头皮,最后流入椎管中的椎旁静脉系统。脑静脉系统有大量交通枝静脉丛,即使两侧颈内静脉都被阻塞,大脑静脉血仍可经椎静脉和颈外静脉系统完成其回流。脑静脉血管内皮细胞的主要功能是维持血管内外的动态平衡,合成和分泌细胞因子和介质参与免疫反应,维持凝血和纤溶的动态平衡。

产品属性

产品名称 小鼠脑静脉血管内皮细胞

组织来源 脑静脉组织

默认种属 昆明小鼠,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)

培养基: 小鼠脑静脉血管内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 每2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 内皮细胞样

传代比例: 1:2

传代特性: 可传2-3代

消化液: 0.25%胰蛋白酶

小鼠脑静脉血管内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的小鼠脑静脉血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的小鼠脑静脉血管内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

复苏准备:脑静脉血管内皮细胞专用完全培养基、无菌 PBS、0.25% 胰酶‑EDTA 消化液置于 37℃水浴回温,超净工作台紫外照射 30min 灭菌,准备 T25 培养瓶、15mL 离心管、全套无菌移液耗材,检查冻存管无开裂渗漏。

冻存管解冻:取出液氮内冻存管,迅速放入 37℃水浴,不断轻晃,1‑2min,大部分冰晶融化,残留少量冰屑即可取出,酒精擦拭管壁,移入超净台。

稀释离心:打开冻存管,细胞悬液缓慢滴入含有 4mL 预热完全培养基的 15mL 离心管,轻柔吹打混匀,1000r/min 离心 5min,沉降细胞,去除含有 DMSO 的冻存上清液。

重悬接种:离心结束弃上清,加入 2mL 脑静脉内皮细胞完全培养基,轻柔吹打重悬细胞沉淀,打散细胞团,将悬液移入 T25 培养瓶,补加培养基,多角度轻晃培养瓶,让细胞均匀铺于瓶底。

恒温孵育贴壁:培养瓶平稳放置于 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱,静置孵育 24h,尽量不移动瓶子,保障内皮细胞贴壁。

换液镜检:24h 后取出,吸弃旧培养基,PBS 轻柔漂洗细胞层,清除悬浮死细胞碎片,更换预热新鲜完全培养基,放回培养箱,每日镜检细胞形态,排查细菌真菌污染。

传代操作:细胞汇合度 80%,弃培养基,PBS 清洗细胞 2 次,加入胰酶消化液 37℃消化 1‑3min,镜下细胞回缩变圆,加入完全培养基终止消化,吹打收集细胞,离心,按适宜比例分瓶传代。