小鼠脑成纤维细胞分离自脑组织；大脑分左右两个半球，大脑皮质（灰质）覆盖着每个大脑半球的大部分，它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面，即外侧面（约占整个皮质面积的1/3）、内侧面和底面（占2/3的面积）；半球表面有很多深浅不等的沟或裂，沟或裂之间的隆起叫回，它们大大增加了大脑的表面积；大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔，使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的脑成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6 h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
产品属性
产品名称 小鼠脑成纤维细胞
组织来源 脑组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 小鼠脑成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠脑成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠脑成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠脑成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
复苏准备：脑成纤维细胞完全培养基、PBS 缓冲液、0.25% 胰蛋白酶‑EDTA 消化液 37℃水浴回温，超净工作台紫外照射 30min 灭菌，准备 T25 培养瓶、15mL 离心管、无菌枪头，核对细胞冻存管编号，确认无漏液破损。
快速解冻细胞：取出液氮保存冻存管，浸入 37℃水浴，轻轻晃动冻存管，1‑2min，大部分冰晶融化，少量冰屑残留即可拿出，75% 酒精擦拭管壁，移入超净台内。
稀释去除冻存剂：无菌打开冻存管，将细胞悬液缓慢加入装有 4.5mL 预热完全培养基的 15mL 离心管，轻柔吹打混匀，1000r/min 离心 5min，沉降活细胞，去除含 DMSO 的冻存上清。
重悬接种培养瓶：离心结束弃上清，加入 2mL 脑成纤维细胞完全培养基，充分吹打重悬底部细胞沉淀，打散细胞团，转移悬液至 T25 培养瓶，补加培养基，平稳摇晃培养瓶使细胞分散均匀。
培养箱静置贴壁：将培养瓶平稳放入 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，静置孵育 24h，不随意挪动瓶子，保障成纤维细胞充分贴壁铺展。
换液清除死细胞：24h 后取出培养瓶，吸弃旧培养基，PBS 轻柔冲洗细胞层，清除漂浮死细胞、碎片，更换新鲜预热完全培养基，放回培养箱，每日显微镜观察细胞生长状态、污染情况。
传代操作：细胞汇合度至 85‑90%，弃培养基，PBS 清洗细胞两次，加入胰酶消化液，37℃孵育 2‑3min，镜下细胞回缩变圆，加入完全培养基终止消化，吹打收集细胞悬液，离心，按 1:2‑1:3 比例分瓶传代继续培养。
