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小鼠毛囊细胞

小鼠毛囊细胞

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产品概述 product description

小鼠毛囊细胞分离自皮肤毛囊组织;毛囊是表皮细胞连续形成的袋样上皮。其基底是真皮凹进的真皮毛乳头,中心是一根毛发,立毛肌的一侧斜附在毛囊壁上,附着点的上方为皮脂腺通入毛囊的短颈,毛囊在皮肤表面的开口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下组织中,毛囊向下伸入真皮约有一厘米深度,它是由包绕毛发与表皮相连的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所组成的一个结构比较复杂的器官附件组织。毛囊实际上是由结缔组织和上皮两部分所组成,除了具有结缔组织和血管的真皮乳头(毛乳头)外,毛囊其余部分都是由表皮细胞分化而来。毛囊开口起始于皮肤表面,而每个毛囊又和一个或多个腺胞相连。每个腺胞解离成富含脂质的物质,却又通过一个共同和毛囊相通连的皮脂腺导管将分泌物运送到皮肤表面排出。

产品属性

产品名称 小鼠毛囊细胞

组织来源 毛囊组织

默认种属 昆明小鼠,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基:  小鼠毛囊细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 每2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 梭形、多角形

传代比例: 1:2

传代特性: 可传1-2代

消化液: 0.25%胰蛋白酶

小鼠毛囊细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的小鼠毛囊细胞经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的小鼠毛囊细胞采用中性蛋白酶-胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

复苏准备:将毛囊细胞专用完全培养基、PBS、0.25% 胰酶‑EDTA 消化液 37℃水浴回温,超净台紫外灭菌 30min,准备 T25 培养瓶、15mL 离心管、无菌移液耗材,检查冻存管外观完好,准备好废液缸。

冻存管解冻:从液氮罐取出细胞冻存管,迅速放入 37℃水浴,不断轻晃冻存管,1‑2min 至大部分冰融化,留有少量冰晶即可,取出后酒精擦拭管壁,移入无菌操作台。

悬液稀释离心:开启冻存管管盖,把细胞悬液缓慢滴入含有 4mL 预热完全培养基的 15mL 离心管,轻柔吹打混匀,转速 1000r/min 离心 5min,去除冻存液中 DMSO 保护剂。

细胞重悬接种:离心完毕倒掉上清,加入 2mL 毛囊细胞完全培养基,反复轻柔吹打管底沉淀,打散细胞聚集团块,将细胞悬液移入 T25 培养瓶,补加培养基至标准体积,水平多角度晃动培养瓶,让细胞均匀铺在瓶底。

恒温孵育贴壁:把培养瓶平稳放置于 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱,静置培养 24h,期间避免移动摇晃,利于毛囊细胞贴壁伸展,减少细胞漂浮死亡。

换液与镜检:培养 24h 后取出培养瓶,吸除全部旧培养基,无菌 PBS 轻轻冲洗细胞表面,除去悬浮死细胞和碎片,更换预热新鲜完全培养基,放回培养箱,每日镜检细胞形态、有无细菌真菌污染。

传代扩增:细胞汇合度到达 75‑80% 时,弃培养基,PBS 洗涤细胞层 2 次,加入胰酶消化液,37℃消化 2‑4min,镜下细胞变圆脱落,添加完全培养基终止消化,吹打收集全部细胞,离心之后按比例分瓶传代培养。