小鼠卵泡膜细胞分离自卵巢组织；卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同，仅左侧发育（右侧已退化），呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官，它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、淋巴管和神经。哺乳动物的卵巢内卵泡的发育需要相关激素的调节才能完成，垂体促性腺激素（卵泡刺激素和黄体生成素）使原始卵泡开始发育，其过程中还产生大量的雌激素。雌激素是卵巢的颗粒细胞和卵泡膜细胞在垂体促性腺激素的作用下协同合成的，卵泡膜细胞合成的雄激素透过基膜进入颗粒细胞，并转变为雌激素。因此，卵泡膜细胞在生殖内分泌调节中占有关键的位置，了解其在病理及生理中的作用，对于与性激素有关的妇产科疾病（如多囊卵巢综合症、卵巢癌等）的研究有着重要意义。在哺乳动物卵泡生长发育的过程中，卵母细胞由不断增加的颗粒细胞层包裹。卵巢组织中的膜细胞作为卵泡的外层细胞可以维持卵泡结构的完整性，参与构成卵母细胞和颗粒细胞发育的微环境且为类固醇激素的生成提供底物。在哺乳动物中调节膜细胞类固醇激素生成的机制已见相关报道，但是有关卵泡膜细胞的聚集、生长和分化的研究尚不深入。
产品属性
产品名称 小鼠卵泡膜细胞
组织来源 卵巢组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 小鼠卵泡膜细胞专用培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠卵泡膜细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠卵泡膜细胞经3β-HSD免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠卵泡膜细胞采用先机械分离后胶原酶消化结合Percoll密度梯度离心法、并通过专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
卵巢取材与卵泡分离：取雌性小鼠，无菌处死后摘取卵巢组织，预冷 PBS 冲洗干净；显微镜下分离卵巢上中等大小卵泡，显微器械剥离卵泡外层卵泡膜组织，与内部颗粒细胞层分离开，收集卵泡膜组织碎片，PBS 漂洗。
组织剪碎预处理：将收集的卵泡膜组织碎片置于无菌培养皿，眼科剪剪切组织至 1 mm³ 细小碎块，PBS 洗涤组织碎块两次，吸除洗涤废液。
胶原酶消化解离组织：加入 Ⅰ 型胶原酶消化液，37℃水浴摇床消化 50‑70 min，每 15 min 轻柔吹打一次；待组织充分松散解离，加入含血清卵泡膜细胞完全培养基终止酶消化。
过滤离心获得细胞沉淀：消化悬液过 200 目无菌细胞筛滤除组织残渣；收集滤液，1100 r/min 离心 7 min，弃除上清废液，得到卵泡膜细胞沉淀。
重悬计数，细胞接种铺板：卵泡膜细胞完全培养基轻柔重悬细胞沉淀，打散细胞团块；活细胞计数，调整细胞浓度接种至无菌培养瓶，置于 37℃、5% CO₂细胞培养箱孵育。
细胞培养换液以及传代：接种 24 h 全量换液去除悬浮死细胞，之后每 2‑3 d 更换新鲜培养基；细胞汇合度达到 80‑85%，胰酶消化，吹打制备单细胞悬液分瓶传代；减少传代次数防止细胞功能丢失。
细胞鉴定、冻存储备：采用 3β‑HSD 类固醇合成相关标志物鉴定卵泡膜细胞；无污染对数生长期细胞配置冻存液，程序梯度降温，液氮罐长期冻存；复苏快速融化，离心去除冻存保护剂再接种。
