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小鼠卵巢上皮细胞

小鼠卵巢上皮细胞

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产品概述 product description

小鼠卵巢上皮细胞分离自卵巢组织;卵巢是雌性动物的生殖器官,卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同,仅左侧发育(右侧已退化),呈葡萄状,均为处于不同发育时期的卵泡,卵泡呈黄色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢,但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构,而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官,它的外表有一层上皮组织,其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分,主要由卵泡和结缔组织构成;髓质位于中央,由疏松结缔组织构成,其中有许多血管、淋巴管和神经。卵巢上皮细胞主要功能:①上皮细胞能分泌激素,刺激卵细胞分化成熟;②细胞能分泌炎症介质,参与炎症反应。

产品属性

产品名称 小鼠卵巢上皮细胞

组织来源 卵巢组织

默认种属 昆明小鼠,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²)

培养基: 小鼠卵巢上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 每2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 上皮细胞样

传代比例: 1:2

传代特性: 可传1-2代

消化液: 0.25%胰蛋白酶

小鼠卵巢上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的小鼠卵巢上皮细胞经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的小鼠卵巢上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

卵巢组织取材预处理:雌性小鼠消毒处死后解剖取出双侧卵巢,预冷无菌 PBS 充分冲洗;剔除输卵管、脂肪等附属组织,完整保留卵巢表面上皮结构。

卵巢上皮组织剥离收集:将卵巢放置无菌培养皿,DispaseⅡ 酶 37℃短时间孵育卵巢组织,促使卵巢表面上皮松动;显微镊子轻柔撕取卵巢表层上皮薄片,PBS 漂洗上皮碎片,尽量少带卵巢间质组织。

酶消化解离上皮细胞:收集上皮薄片,剪碎后加入 0.25% 胰蛋白酶‑EDTA 消化液,37℃水浴孵育 15‑20 min,间断轻柔吹打;细胞解离完成,加入卵巢上皮细胞完全培养基终止消化。

过滤处理,离心收集沉淀:消化后的细胞悬液过 300 目无菌细胞筛除去组织残渣;滤液 1100 r/min 离心 7 min,弃除上层废液,获得卵巢上皮细胞沉淀。

重悬纯化,细胞接种铺板:卵巢上皮专用完全培养基轻柔重悬细胞沉淀;差速贴壁去除卵巢间质来源成纤维细胞杂细胞,短暂预贴壁,收集未贴壁上皮细胞;计数后接种胶原包被培养器皿。

细胞培养维护、定期换液:37℃、5% CO₂培养箱孵育,接种 24 h 全量换液清除死细胞,后续每 2‑3 d 更换新鲜培养基;观察多边形上皮细胞形态,严格监控间质成纤维细胞污染。

细胞鉴定与冻存保存:CK‑18、E‑cadherin 上皮标志物免疫荧光鉴定细胞纯度;原代卵巢上皮增殖能力弱,汇合 70‑80% 即可冻存,梯度降温液氮储存,复苏尽快用于体外实验。