小鼠淋巴管内皮细胞分离自淋巴管组织；淋巴管由毛细淋巴管汇合而成。其形态结构与静脉相似，但管径较细，管壁较薄，瓣膜较多且发达，外形呈串珠状。淋巴管根据其位置分为浅、深二种。它们管位于皮下，常与浅静脉伴行，收集皮肤和皮下组织的淋巴。深淋巴管与深部血管伴行，收集肌肉和内脏的淋巴。浅、深淋巴管之间有广泛的交通支。淋巴管在向心行程中，通常经过一个或多个淋巴结，从而把淋巴细胞带入淋巴液。主要功能是滤过淋巴液，产生淋巴细胞和浆细胞，参与机体的免疫反应。当局部感染时，细菌、病毒或癌细胞等可沿淋巴管侵入，引起局部淋巴结肿大。如该淋巴结不能阻止和消灭它们，则病变可沿淋巴管的流注方向扩散和转移。淋巴管内皮细胞（LEC）是衬覆于淋巴管内表面的一种单层扁平上皮，是构成淋巴管壁的主要结构，参与维持体液平衡，调节淋巴细胞再循环和机体的免疫反应和组织液及蛋白质的运输，在疾病过程中也起着重要作用。近年研究表明，LEC还在伤口愈合、淋巴管水肿和炎症扩散等病理过程中起重要作用，而且与肿瘤转移密切相关。淋巴管内皮细胞主要功能：①调节体液、蛋白和组织压力平衡；②为免疫系统的重要组成部分。淋巴管内皮细胞与主要病生理变化：①囊肿型淋巴管瘤；②淋巴管炎；③淋巴结核。
产品属性
产品名称 小鼠淋巴管内皮细胞
组织来源 淋巴管
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）或明胶（0.1%）
培养基： 小鼠淋巴管内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 内皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠淋巴管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠淋巴管内皮细胞经VEGFR3免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠淋巴管内皮细胞采用中性蛋白酶消化法结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
组织取材分离预处理：选取小鼠耳廓、肠系膜组织作为取材来源，小鼠消毒处死后，无菌摘取耳廓或者肠系膜组织，置于预冷无菌 PBS；精细剔除脂肪、肌肉、血管等多余组织，PBS 多次冲洗组织血块杂质。
组织剪碎与复合酶消化：将目标组织剪碎至 1 mm³ 组织碎块，PBS 洗涤两次；加入胶原酶 Ⅰ+ 胶原酶 Ⅳ 复合消化液，37℃水浴摇床消化 50‑80 min，每隔 20 min 轻柔吹打，待组织松散，加入内皮细胞完全培养基终止消化。
过滤获得粗细胞悬液：消化后的混合悬液过 200 目、400 目双层无菌细胞筛，滤除未消化组织纤维残渣，收集全部过滤后的细胞悬液移入无菌离心管。
离心沉淀细胞，初步重悬：1200 r/min 离心 7 min，弃去上清废液；加入淋巴管内皮细胞专用完全培养基轻柔重悬底部细胞沉淀，充分打散细胞团聚块。
免疫磁珠纯化与细胞接种：利用 LYVE‑1 免疫磁珠分选富集淋巴管内皮细胞，去除血管内皮、成纤维细胞杂细胞；分选完成之后进行活细胞计数，接种于明胶包被的细胞培养器皿，放入 37℃、5% CO₂培养箱。
细胞培养、定期换液传代：接种 24 h 全量换液，去除死细胞与未结合磁珠碎片；之后每 2‑3 d 更换内皮完全培养基；细胞汇合至 80% 左右，胰酶温和消化分瓶传代，尽量使用低代次细胞。
细胞鉴定和液氮冻存：采用 LYVE‑1、Prox‑1 淋巴管内皮特异性标志物免疫荧光鉴定细胞纯度；状态优良无污染细胞配置内皮细胞冻存液，程序梯度降温，液氮罐长期保存。
