小鼠晶状体上皮细胞分离自晶状体组织；晶状体源自胚胎发育外胚层，仅含有上皮细胞及其产物，晶状体囊膜作为屏障将晶状体与其它类型细胞完全分开；因而，晶状体上皮细胞培养既无神经和血管组织的干扰，又不受其它类型细胞如成纤维细胞的污染，保证了培养中细胞成分的单一性。晶状体上皮细胞主要负责调节晶状体的生理平衡，包括电解质和液体的输送。在正常的发育过程中，晶状体上皮细胞分化和成熟，然后迁移到晶状体内部，产生晶体蛋白，自身也拉长而变成晶状体纤维细胞，并最终失去细胞核和其它的细胞器。研究表明，晶状体上皮细胞的分化和极化受到了眼部液体中的生长因子的调控，包括表皮生长因子和胰岛素等。细胞贴壁后为扁平不规则多角形，呈单层生长、连成膜状。晶状体上皮细胞是紧密贴附于晶状体前囊内表面的单层上皮细胞，其异常增殖和分化与白内障和后囊混浊的发生密切相关，体外培养是研究其生长规律的主要手段。
产品属性
产品名称 小鼠晶状体上皮细胞
简称 LECs
组织来源 晶状体组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： 鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）
培养基： 小鼠晶状体上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 上皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠晶状体上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠晶状体上皮细胞经BFSP2（晶状体蛋白）免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠晶状体上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
眼球与晶状体取材：小鼠消毒处死后摘取完整眼球，浸泡预冷无菌 PBS；体视显微镜下剪开眼球巩膜，小心取出透明晶状体组织，剔除虹膜、玻璃体、视网膜等周边附属组织，PBS 轻柔冲洗晶状体表面杂质。
晶状体上皮组织剥离：将晶状体放置培养皿，显微镊子撕开晶状体囊膜，收集附着于囊膜内侧的晶状体上皮组织，尽量不要混入晶状体纤维组织，PBS 漂洗囊膜上皮碎片。
酶消化解离上皮细胞：收集囊膜上皮碎片移入离心管，加入 0.25% 胰蛋白酶‑EDTA 消化液，37℃水浴孵育 20‑30 min，间隔 10 min 轻柔吹打，待细胞解离，添加上皮细胞完全培养基终止消化反应。
过滤处理，离心富集细胞：细胞悬液过 300 目无菌筛网，除去囊膜组织残渣；收集滤液，1100 r/min 离心 7 min，缓慢弃除上清，保护松散细胞沉淀。
重悬计数，接种铺板：晶状体上皮细胞专用完全培养基轻柔重悬细胞沉淀；活细胞计数，调整细胞密度，接种于明胶包被的培养板、培养瓶，置于 37℃、5% CO₂培养箱孵育。
细胞培养维护与换液：接种 24 h 后全量换液，清除漂浮死细胞，之后每 2‑3 d 更换新鲜培养基；显微镜观察多边形上皮细胞形态，避免成纤维细胞杂细胞大量增殖。
细胞鉴定、冻存保管：使用 α‑crystallin 晶状体特异性蛋白、CK 标志物做免疫荧光鉴定；原代晶状体上皮细胞传代能力有限，低汇合度冻存；程序梯度降温后液氮长期保存，尽量使用初代细胞开展体外实验。
