小鼠脊髓成纤维细胞分离自脊髓组织;脊髓是细细的管束状的神经结构,位于脊柱的椎管内且被脊椎保护;是源自脑的中枢神经系统延伸部分。中枢神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物中枢神经系统的一部分,在椎管里面,上端连接延髓,两旁发出成对的神经,分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形(蝴蝶型)灰质区,主要由神经细胞构成;在灰质区周围为白质区,主要由有髓神经纤维组成;脊髓是许多简单反射的中枢。脊髓两旁发出许多成对的神经(称为脊神经)分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。脊髓是周围神经与脑之间的通路,也是许多简单反射活动的低级中枢。按脊神经的出入可把脊髓也分为相应的31节,31对脊神经就是由不同的脊椎发出的。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来;成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的脊髓成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6 h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。脊髓成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括:构造和维持组织的正常形态;合成和释放细胞外基质;组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
产品属性
产品名称 小鼠脊髓成纤维细胞
组织来源 脊髓组织
默认种属 昆明小鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 小鼠脊髓成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传3代左右
消化液: 0.25%胰蛋白酶
小鼠脊髓成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠脊髓成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠脊髓成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
无菌准备:超净台紫外消毒 30min,脊髓成纤维细胞完全培养基、PBS、胰酶消化液,37℃水浴预热;T25 培养瓶、离心管,标记细胞名称日期。
冻存细胞复苏:冻存管 37℃水浴快速融化,酒精消毒管壁移入超净台,细胞悬液转移至装有完全培养基离心管轻柔混匀。
离心去除冻存保护剂:300g 室温离心 5min,吸弃冻存液上清。
重悬接种:加入成纤维完全培养基,吹打打散细胞团,细胞计数,按推荐密度接种 T25 培养瓶,多角度晃动培养瓶铺匀细胞。
恒温孵育贴壁:放入 37℃、5% CO₂培养箱静置培养,复苏 48h 不要移动培养瓶。
换液维护:48h 后首次换液,吸除旧培养基,PBS 轻柔冲洗细胞层,去除悬浮死细胞碎片,补入新鲜培养基,每 2‑3 天换液,观察梭形成纤维细胞。
消化传代收集:细胞汇合 80%,弃培养基,PBS 清洗,胰酶消化,镜下细胞回缩,完全培养基终止消化;离心收集细胞,用于脊髓损伤体外共培养模型。
