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小鼠虹膜色素上皮细胞

小鼠虹膜色素上皮细胞

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产品概述 product description

小鼠虹膜色素上皮细胞分离自眼球虹膜组织;虹膜是眼睛构造的一部分,属于眼球中层,位于血管膜的最前部;在睫状体前方虹膜,中心有一圆形开口,称为瞳孔,犹如相机当中可调整大小的光圈,内含色素决定眼睛的颜色。日间光线较为强烈时,虹膜会收蹜,只使一小束光线穿透瞳孔,进入眼睛;当进入黑暗环境中,虹膜就会往后退缩,使瞳孔变大,让更多的光线进入眼睛,多数的脊椎动物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮细胞(IPE)是虹膜重要结构组成细胞之一,位于虹膜组织的后面,和视网膜色素上皮细胞(RPE)同样起源于神经外胚叶层,可能具有相似的生物学功能,因此对IPE的研究将为防治因RPE结构或功能异常而导致的眼底病提供新思路。

产品属性

产品名称 小鼠虹膜色素上皮细胞

组织来源 眼球

默认种属 昆明小鼠,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²)

培养基: 小鼠虹膜色素上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 每2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 上皮细胞样

传代比例: 1:2

传代特性: 可传1-2代

消化液: 0.25%胰蛋白酶

小鼠虹膜色素上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的小鼠虹膜色素上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的小鼠虹膜色素上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

无菌准备:超净台紫外灭菌 30min,色素上皮细胞完全培养基、PBS、胰酶消化液,37℃水浴预热;包被培养板、离心管,标记信息。

冻存细胞复苏:冻存管 37℃水浴快速融化,酒精擦拭管壁转入超净台,细胞悬液加入完全培养基离心管轻柔混匀。

离心去除冻存保护剂:300g 室温离心 6min,小心吸弃上清,保护细胞沉淀。

重悬接种:加入色素上皮完全培养基,轻柔吹打制备细胞悬液,计数活细胞,接种包被培养板,晃动板子均匀铺细胞。

孵育贴壁培养:置于 37℃、5% CO₂培养箱静置孵育,色素上皮贴壁缓慢,72h 减少挪动。

换液维护:72h 后首次换液,轻柔吸除旧培养基,PBS 低力度冲洗,避免冲掉细胞,补新鲜培养基,每 2‑3 天换液,观察带色素颗粒上皮细胞。

消化收集细胞:汇合 70‑75%,胰酶温和消化,培养基终止消化;离心收集细胞,避免多次传代,用于眼部相关体外模型实验。