小鼠冠状动脉平滑肌细胞分离自冠状动脉组织；冠状动脉是供给心脏血液的动脉，起于主动脉根部，分左右两支，行于心脏表面。采用Schlesinger等的分类原则，将冠状动脉的分布分为三型：右优势型、均衡型、左优势型。左右冠状动脉是升主动脉的第一对分支。左冠状动脉为一短干，发自左主动脉窦，经肺动脉起始部和左心耳之间，沿冠状沟向左前方行后，立即分为前室间支和旋支。前室间支沿前室间沟下行，旋支绕过心尖切迹至心的膈面与右冠状动脉的后室间支相吻合。它是构成冠状动脉壁的主要细胞成分，细胞膜上分布着多种离子通道，如电压依赖性Na⁺通道、多种Ca²⁺通道和K⁺通道；它们参与了静息电位的维持与细胞膜电位的复极化、超极化，调节血管平滑肌的收缩及舒张功能，此外动脉粥样硬化的发展也涉及冠状动脉平滑肌细胞增殖、炎症及凋亡等。因此，原代分离培养的冠状动脉平滑肌细胞，对研究生理和病理状态下离子通道及血管张力变化机制具有非常重要的作用。冠状动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
产品属性
产品名称 小鼠冠状动脉平滑肌细胞
简称 CASMCs
组织来源 冠状动脉
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 小鼠冠状动脉平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠冠状动脉平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠冠状动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠冠状动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
无菌准备：超净台紫外消毒 30min，平滑肌细胞完全培养基、PBS、胰酶消化液，37℃水浴预热；准备 T25 培养瓶、离心管，标记细胞信息。
冻存细胞复苏：冻存管 37℃水浴快速融化，酒精消毒管壁移入超净台，细胞悬液加入装有完全培养基的离心管轻柔混匀。
离心去除冻存保护剂：300g 室温离心 5min，吸弃上层冻存液上清。
重悬铺瓶：加入平滑肌完全培养基，轻柔吹打打散细胞团，细胞计数，按适宜密度接种 T25 培养瓶，多角度晃动培养瓶，细胞均匀铺底。
孵育贴壁培养：置于 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱静置培养，复苏初期 48h 避免挪动培养瓶。
换液维护细胞：48h 后首次换液，吸弃旧培养基，PBS 轻柔漂洗细胞层，去除悬浮碎片死细胞，补入新鲜培养基，每 2‑3 天换液，观察梭形平滑肌细胞。
消化传代处理：细胞汇合 75‑80%，弃培养基，PBS 清洗，胰酶消化，镜下细胞回缩，完全培养基终止消化；收集悬液离心计数，用于收缩表型、增殖迁移实验。
