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小鼠冠状动脉内皮细胞

小鼠冠状动脉内皮细胞

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产品概述 product description

小鼠冠状动脉内皮细胞分离自冠状动脉组织;冠状动脉是供给心脏血液的动脉,起于主动脉根部,分左右两支,行于心脏表面。采用Schlesinger等的分类原则,将冠状动脉的分布分为三型:右优势型、均衡型、左优势型。左右冠状动脉是升主动脉的第一对分支。左冠状动脉为一短干,发自左主动脉窦,经肺动脉起始部和左心耳之间,沿冠状沟向左前方行后,立即分为前室间支和旋支。前室间支沿前室间沟下行,旋支绕过心尖切迹至心的膈面与右冠状动脉的后室间支相吻合。冠状动脉内皮细胞呈单层扁平分布,是一薄层的专门上皮细胞,它形成冠状动脉的内壁,是血管管腔内血液及其他血管壁(单层鳞状上皮)的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统,由心脏直至最小的微血管。

产品属性

产品名称 小鼠冠状动脉内皮细胞

简称 CAECs

组织来源 冠状动脉

默认种属 昆明小鼠,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)

培养基: 小鼠冠状动脉内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 每2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 内皮细胞样

传代比例: 1:2

传代特性: 可传2-3代

消化液: 0.25%胰蛋白酶

小鼠冠状动脉内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的小鼠冠状动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的小鼠冠状动脉内皮细胞采用混合酶短暂消化后组织贴块、结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

无菌准备:超净台紫外灭菌 30min,内皮细胞专用完全培养基、无菌 PBS、胰酶消化液,37℃水浴预热;准备明胶包被 T25 培养瓶、离心管,做好标记。

冻存细胞复苏:冻存管 37℃水浴快速融化,酒精擦拭外壁转入超净台,细胞悬液缓慢滴入含有内皮完全培养基的离心管混匀。

离心去除冻存保护剂:300g 室温离心 6min,小心吸弃上清液,不要触碰细胞沉淀。

重悬接种:加入预热内皮完全培养基,轻柔吹打制备单细胞悬液,计数活细胞,接种至明胶包被培养瓶,晃动培养瓶使细胞均匀分布。

恒温孵育贴壁:放入 37℃、5% CO₂培养箱静置孵育,包被培养瓶利于内皮细胞贴壁,复苏 48h 减少移动。

换液去除杂细胞:复苏 48h 进行首次换液,吸除旧培养基,PBS 轻柔冲洗,去除悬浮死细胞杂质,补入新鲜完全培养基,每 2‑3 天换液,观察鹅卵石样内皮形态。

消化传代收获:细胞汇合 70‑80%,弃培养基,PBS 洗涤,胰酶短时间消化,镜下细胞变圆脱落,培养基终止消化;收集细胞离心计数,用于血管功能、屏障模型实验。