小鼠关节软骨细胞分离自关节软骨组织；关节软骨属于透明软骨，表面光滑、呈淡蓝色、有光泽，它是由一种特殊的叫做致密结缔组织的胶原纤维构成的基本框架，这种框架呈半环形，类似拱形球门，其底端紧紧附着在下面的骨质上，上端朝向关节面，这种结构使关节软骨紧紧与骨结合起来而不会掉下来，同时当受到压力时候，还可以有少许的变形，起到缓冲压力的作用。在这些纤维之间，散在分布着软骨细胞，软骨细胞由浅层向深层逐渐由扁平样至椭圆或圆形的细胞组成，这些软骨细胞维持关节软骨的正常代谢。关节软骨没有神经支配，也没有血管，其营养成分必须从关节液中取得，而其代谢废物也必须排至关节液中，关节软骨的这种营养代谢必须通过关节运动，使关节软骨不断的受到压力刺激才行，所以关节运动对于维持关节软骨的正常结构起重要的作用。关节软骨细胞位于关节软骨陷窝内。幼稚的关节软骨细胞位于关节软骨组织的表层，单个分布、体积较小、呈椭圆形，长轴与关节软骨表面平行，越向深层的关节软骨细胞体积之间增大呈圆形，细胞核圆形或卵圆形、染色浅，细胞质弱嗜碱性，常见数量不一的脂滴。成熟的关节软骨细胞多2-8个成群分布于关节软骨陷窝内，这些关节软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成，称为同源细胞群。电镜下，关节软骨细胞有突起和皱褶，细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中，关节软骨细胞收缩为不规则形，在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的关节软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
产品属性
产品名称 小鼠关节软骨细胞
组织来源 关节软骨组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 小鼠关节软骨细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每3-4天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 梭形、多角形
传代比例： 1:2
传代特性： 可传2-3代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠关节软骨细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠关节软骨细胞经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠关节软骨细胞采用胶原酶联合中性蛋白酶消化制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
无菌准备：超净台紫外消毒 30min，软骨细胞完全培养基、PBS、胰酶消化液，37℃水浴预热，准备 T25 培养瓶、离心管，标记细胞信息。
冻存细胞复苏：冻存管 37℃水浴快速融化，酒精消毒管壁移入超净台，细胞悬液转移至含有完全培养基的离心管轻柔混匀。
离心去除冻存保护剂：300g 室温离心 5min，吸弃上清，保留底部软骨细胞沉淀。
重悬接种：加入软骨细胞完全培养基，轻柔吹打散细胞团，进行细胞计数，按推荐密度接种 T25 培养瓶，多角度晃动培养瓶，细胞均匀铺底。
培养箱孵育贴壁：37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱静置培养，前 48h 不要挪动培养瓶，利于软骨细胞贴壁伸展。
定期换液维护：48h 后首次换液，吸除旧培养基，PBS 轻柔洗涤细胞层，去除死细胞碎片，补充新鲜完全培养基，每 2‑3 天换液，观察多边形软骨细胞形态。
消化传代收集：细胞汇合 75‑80%，弃培养基，PBS 清洗，胰酶消化，镜下细胞回缩变圆，加入完全培养基终止消化；收集细胞离心计数，尽量控制传代次数，防止软骨细胞去分化，用于成软骨诱导实验。
