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小鼠骨细胞

小鼠骨细胞

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产品概述 product description

小鼠骨细胞分离自骨组织;骨组织的细胞成分包括骨原细胞、成骨细胞、骨细胞和破骨细胞。只有骨细胞存在于骨组织内,其他三种细胞均位于骨组织的边缘。骨细胞(Osteocyte)是人体骨骼中最主要的细胞成分。在成年人骨骼中,骨细胞占细胞总数量的90%-95%,大约是成骨细胞数量的20倍。骨细胞生长在骨骼内部的骨基质中。骨细胞的细胞体呈梭形或类圆形,位于基质构成的骨陷窝内。与神经细胞类似,每个骨细胞具有大量向外延伸的突触,而这些突触均位于由骨基质构成的骨小管结构中。通过这些突触,骨细胞能够与骨表面的细胞、周围其它的骨细胞进行“交流”。普遍认为,骨细胞起源于成骨细胞。在骨形成的终末阶段,成骨细胞将可能有3种不同的归宿:分化成为骨细胞、转移至骨表面成为暂不活动的成骨细胞、进入程序死亡过程(凋亡)。骨细胞为扁椭圆形多突起的细胞,核亦扁圆、染色深。胞质弱嗜碱性。电镜下,胞质内有少量溶酶体、线粒体和粗面内质网,高尔基复合体亦不发达。骨细胞夹在相邻两层骨板间或分散排列于骨板内。相邻骨细胞的突起之间有缝隙连接。在骨基质中,骨细胞胞体所占据的椭圆形小腔,称为骨陷窝,其突起所在的空间称骨小管。相邻的骨陷窝借骨小管彼此通连。骨陷窝和骨小管内均含有组织液,骨细胞从中获得养分。

产品属性

产品名称 小鼠骨细胞

组织来源 骨组织

默认种属 昆明小鼠,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基:  小鼠骨细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 每2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 梭形、多角形

传代比例: 不传代

传代特性: 不增殖;不传代

消化液: 0.25%胰蛋白酶

小鼠骨细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的小鼠骨细胞经骨钙素免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的小鼠骨细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

无菌准备:超净台紫外灭菌 30min,骨细胞专用完全培养基、PBS、0.25% 胰酶‑EDTA,37℃水浴预热;准备培养皿、离心管,做好标记。

冻存细胞复苏:冻存管 37℃水浴快速融化,酒精擦拭管壁移入超净台,细胞悬液滴入含有完全培养基的离心管轻柔混匀。

离心去除冻存保护剂:300g 室温离心 6min,缓慢吸走上层上清,保护管底脆弱骨细胞沉淀。

重悬铺板:加入预热骨细胞完全培养基,轻柔吹打重悬细胞,减少剪切力损伤;计数活细胞,按合适密度接种培养皿,水平晃动使细胞均匀分布。

恒温孵育贴壁:置于 37℃、5% CO₂培养箱静置孵育,骨细胞贴壁速度慢,复苏 72h 内尽量不移动培养器皿。

谨慎换液操作:复苏 72h 后首次换液,缓慢吸除旧培养基,PBS 极轻柔漂洗,避免冲掉贴壁骨细胞,补入新鲜完全培养基,每 2‑3 天换液,观察星状骨细胞形态。

收获细胞开展实验:骨细胞增殖能力弱,不建议多次传代;需要收集细胞时,胰酶短时间消化,镜下观察细胞脱落,培养基终止消化,离心收集细胞,用于骨代谢相关检测。