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小鼠骨髓树突状细胞(DC细胞)

小鼠骨髓树突状细胞(DC细胞)

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产品概述 product description

本细胞分离自小鼠骨髓组织。树突状细胞(DC细胞)是小鼠体内功能最强的专职抗原提呈细胞,起源于骨髓造血干细胞,具有摄取、加工和提呈抗原的核心功能,可激活初始T淋巴细胞,启动特异性免疫应答,在固有免疫与适应性免疫的桥梁作用中至关重要。其广泛分布于全身组织器官,成熟后可迁移至淋巴器官,通过表达高水平的MHC分子和共刺激分子,高效激活免疫反应。小鼠骨髓树突状细胞原代诱导培养5-7天后开始成熟,初始形态呈圆形或短梭形;成熟后细胞表面出现大量树突状突起,形态不规则;传代后可稳定维持抗原提呈功能。该细胞是研究小鼠免疫应答启动机制、抗原提呈过程、免疫调节网络及相关免疫性疾病、肿瘤免疫治疗的核心实验材料,适用于小鼠动物模型相关的免疫研究。

产品属性

产品名称:小鼠骨髓树突状细胞(DC细胞)

组织来源:小鼠骨髓组织

默认种属 昆明小鼠,其他咨询

产品规格:5×10⁵Cells/T25
培养基: 小鼠骨髓树突状细胞完全培养基(含FBS、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素-4、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:半贴壁生长,成熟后悬浮或轻度贴壁

细胞形态:未成熟时呈圆形、短梭形;成熟后呈不规则形,表面有大量树突状突起

传代比例:1:2

传代特性:可传2-4代;1-2代以内细胞抗原提呈功能最稳定

消化液:0.25%胰蛋白酶

小鼠骨髓树突状细胞(DC细胞)体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证ᡟ餤ᡟ

质量检测

经树突状细胞特异性标志物(CD11c、MHC-Ⅱ)免疫荧光鉴定,本细胞纯度可达90%以上;经抗原提呈实验验证细胞功能正常;经检测不含有支原体、细菌、酵母和真菌等外源污染物,细胞活性达标。

方法简介

实验室采用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞,结合体外细胞因子诱导培养法制备该细胞,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

无菌前期准备:超净台紫外灭菌 30min,准备添加 GM‑CSF、IL‑4 的 DC 诱导完全培养基、PBS、离心管、培养板,试剂 37℃预热,耗材无菌处理。

冻存骨髓细胞复苏:冻存管 37℃水浴快速融化,酒精消毒管壁移入超净台,将细胞悬液转移至含有诱导培养基的离心管混匀。

离心洗涤去除冻存液:300g 室温离心 5min,吸弃上层冻存保护剂上清。

重悬铺板:加入含细胞因子的 DC 诱导培养基,充分吹打重悬细胞沉淀,台盼蓝计数活细胞,按实验密度接种于培养板,轻柔晃动混匀。

细胞诱导孵育:放置 37℃、5% CO₂培养箱培养,GM‑CSF 联合 IL‑4 诱导骨髓细胞向树突状细胞分化。

定时半量换液:第 3 天、第 5 天分别进行半量换液,吸出一半旧培养基,补入同等体积新鲜诱导培养基,继续培养至第 7‑8 天,观察悬浮 / 半悬浮 DC 细胞。

收集成熟 DC 细胞:轻轻吹打培养孔,收集悬浮以及半贴壁树突状细胞,离心收集细胞沉淀,可进行 LPS 刺激成熟、抗原呈递、流式表型检测;DC 不适合胰酶消化传代。