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小鼠骨髓单个核细胞

小鼠骨髓单个核细胞

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产品概述 product description

小鼠骨髓单个核细胞分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓单个核细胞是骨髓中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。注意这里是(mononuclear cell)单个核细胞,而不是(Monocyte)单核细胞。单个核细胞的体积、形态和比重与骨髓其他细胞不同,利用一定比例聚蔗糖和泛影酸钠形成的等渗溶液作密度梯度离心,使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,可将各种血细胞与单个核细胞分离。

产品属性

产品名称 小鼠骨髓单个核细胞

简称 BMMC

组织来源 骨髓

默认种属 昆明小鼠,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基:  小鼠骨髓单个核细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 每2-3天换液一次

生长特性: 半贴壁半悬浮

细胞形态: 圆形

传代比例: 不传代

传代特性: 不增殖;不传代

消化液: 0.25%胰蛋白酶

小鼠骨髓单个核细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的小鼠骨髓单个核细胞,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的小鼠骨髓单个核细胞采用取骨髓、通过密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

无菌预处理:开启超净台紫外消毒 30min,准备 RPMI‑1640 基础培养基、PBS、淋巴细胞分离液、离心管,全部试剂室温平衡,避免低温导致细胞损伤。

复苏 / 样本制备:若是冻存单个核细胞,37℃水浴快速融化冻存管,酒精消毒后转入超净台;将细胞悬液缓慢叠加到淋巴细胞分离液上层,注意保持两层液体界面清晰,不要混合。

密度梯度离心:设置离心机参数 400g,室温离心 20min,离心机设置降速档位为最低,防止破坏分层效果。离心结束管内会出现清晰白膜层,即为骨髓单个核细胞层。

吸取目标细胞:超净台内小心吸取中间乳白色白膜层细胞,转移至全新 15mL 离心管,加入足量 PBS 稀释细胞悬液,降低分离液残留毒性。

洗涤离心纯化:300g 室温离心 8min,吸弃上清,去除分离液与血小板碎片沉淀;再次加入 PBS 重悬,重复洗涤一次,最大程度去除残留分离液。

细胞计数铺板:加入完全培养基重悬细胞沉淀,进行细胞活率计数,按照实验需求密度接种于培养板或者培养瓶,轻柔晃动混匀。

孵育与后续处理:放入 37℃、5% CO₂培养箱培养;根据实验用途,可直接用于流式检测、共培养,短期培养 24‑48h,及时去除悬浮死细胞,不要长时间体外扩增。