小鼠肝实质细胞分离自肝脏组织;肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用;肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构:肝脏位于右上腹,隐藏在右侧膈下和肋骨深面,大部分肝为肋弓所复盖,仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁,肝上面则与膈及腹前壁相接。肝实质细胞是指具有肝功能的单位,是肝脏的基本组成单位之一。肝实质细胞与主要病生理变化:急性肝炎、肝硬化、肝脓肿。肝实质细胞属于中高度分化细胞,生长营养需求高,在体外存活时间短;细胞呈圆形或多角形,核大而圆,居中,常染色质丰富,部分有双核或多倍体核。肝脏作为体内重要的器官,在整个物质代谢过程中具有广泛而多样的作用。
产品属性
产品名称 小鼠肝实质细胞
组织来源 肝脏组织
默认种属 昆明小鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²)
培养基: 小鼠肝实质细胞完全培养基(基础培养基,含FBS、Insulin、Dexamethasone、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 上皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1代,不建议传代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
小鼠肝实质细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠肝实质细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠肝实质细胞采用混合酶灌流消化、反复低速离心制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
复苏解冻:取出冻存管,37℃水浴快速融化冻存液,剩微小冰晶取出,75% 酒精擦拭管壁带入超净台;肝细胞比较脆弱,全部操作降低剪切力。
悬液转移:无菌打开冻存管,细胞悬液缓慢移入肝实质细胞完全培养基的 15mL 离心管,轻柔颠倒混匀。
低速离心:900r/min 离心 6min,降低转速减少肝细胞破损,离心结束轻柔吸弃上清冻存液。
重悬沉淀:加入预热肝实质细胞完全培养基,使用大口径枪头缓慢吹打 3‑5 次,松散沉淀,不要反复吹打。
接种铺板:细胞计数,按实验密度接种胶原包被的培养板,十字轻轻晃动。
孵育贴壁:放入 37℃、5% CO₂培养箱静置孵育 24‑48h,全程尽量不移动培养器皿。
换液观察:48h 后半量更换新鲜培养基,后续每 2‑3 天半量换液,观察多边形肝细胞形态,不要等到长满,汇合 70‑80% 即可开展实验。
