小鼠肺动脉成纤维细胞分离自肺动脉组织;肺动脉亦称肺动脉干。在呼吸空气的脊椎动物中,把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺大动脉起于右心室,在主动脉之前向左上后方斜行,在主动脉弓下方分为左、右肺动脉,经肺门入肺。肺动脉干位于心包内,为一粗短的动脉干。起自右心室,在升主动脉前方向左后上方斜行,至主动脉弓下方分为左、右肺动脉。左肺动脉较短,在左主支气管前方横行,分二支进入左肺上、下叶。右肺动脉较长而粗,经升主动脉和上腔静脉后方向右横行,至右肺门处分为三支进入右肺上、中、下叶。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来;成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺动脉成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6 h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。肺动脉成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括:构造和维持肺动脉的正常形态;合成和释放细胞外基质;组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
产品属性
产品名称 小鼠肺动脉成纤维细胞
组织来源 肺动脉组织
默认种属 昆明小鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 小鼠肺动脉成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传3代左右
消化液: 0.25%胰蛋白酶
小鼠肺动脉成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠肺动脉成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠肺动脉成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
冻存复苏:液氮取出冻存管,37℃水浴快速融化冻存液,留有少量冰晶取出,酒精消毒管壁带入超净台。
悬液转移:无菌开启冻存管,细胞悬液转移至装有肺动脉成纤维细胞完全培养基的 15mL 离心管,轻柔混匀。
离心洗涤:1000r/min 离心 5min,离心完毕,弃除上层冻存上清,留存底部细胞沉淀。
重悬沉淀:加入预热专用完全培养基,吹打沉淀充分打散细胞团,制备单细胞悬液。
接种铺板:细胞计数,按推荐密度接种,十字摇晃培养瓶,使细胞均匀铺底。
孵育贴壁:放置 37℃、5% CO₂培养箱静置 24h,不要挪动培养瓶。
换液观察:24h 更换新鲜培养基,2‑3 天换液一次,观察长梭形成纤维细胞,汇合 85‑90% 传代。
