小鼠肠静脉内皮细胞分离自肠静脉；肠道指的是从胃幽门至肛门的消化管。肠是消化管中最长的一段，也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的，大肠主要浓缩食物残渣，形成粪便，再通过直肠经肛门排出体外。肠道堪称身体最劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足够的养分，其实它的功能还远不止此——它还是机体内最大的微生态系统。
产品属性
产品名称 小鼠肠静脉内皮细胞
组织来源 肠组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）或明胶（0.1%）
培养基： 小鼠肠静脉内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 内皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传2-3代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠肠静脉内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠肠静脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠肠静脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
步骤一：内皮细胞专用无菌准备 提前30分钟紫外消毒超净工作台及所有实验耗材，校准培养箱精准参数。肠静脉内皮细胞增殖速率较慢、敏感度高，提前预热静脉内皮专用完全培养基、无菌PBS、温和消化液，培养基添加特异性内皮生长因子，排查试剂无杂质、无污染。操作人员严格无菌操作，杜绝环境扰动影响细胞生长。
步骤二：温和解冻细胞复苏 取出冻存的小鼠肠静脉内皮细胞，37℃水浴轻柔快速解冻，1分钟内完成解冻，留存微量冰晶取出。酒精消毒冻存管外壁，无菌转移细胞悬液至含预热完全培养基的离心管中，轻柔吹打混匀，稀释冻存保护剂，最大程度保留细胞活性。
步骤三：低速离心纯化室温230g离心6分钟，低速温和沉降细胞，避免损伤脆弱的静脉内皮细胞。离心后吸弃上清废液，加入预热无菌PBS缓冲液重悬细胞沉淀，再次离心清洗，彻底去除残留冻存液与代谢杂质，提升细胞纯度。
步骤四：适宜密度接种 吸弃PBS废液，加入静脉内皮专用培养基，轻柔吹打制备均匀单细胞悬液，计数后调整细胞密度至9×10⁴个/mL，适中密度接种利于细胞形成完整单层结构。接种后缓慢晃动培养瓶，使细胞均匀分散贴壁。
步骤五：长时恒温贴壁培养 将培养瓶置于37℃、5%CO₂饱和湿度培养箱静置培养30小时，肠静脉内皮细胞贴壁速度较慢，全程稳定环境参数，禁止扰动培养瓶，保证细胞充分贴壁、伸展、形成规整内皮结构。
步骤六：低频精细化换液 培养30小时后完成首次换液，轻柔吸弃旧培养基，更换新鲜预热完全培养基，去除悬浮死细胞。后续每72小时换液一次，减少换液频次，避免机械扰动损伤单层内皮结构，持续维持细胞正常形态与功能。
步骤七：低比例传代扩增 细胞融合度达80%时进行传代，PBS轻柔清洗细胞2次，加入温和胰酶消化液消化4分钟，细胞回缩脱壁后立即终止消化。温和收集细胞悬液，离心重悬后按1:2.5比例传代，严控传代密度，保护内皮细胞单层结构完整性。
