小鼠背根神经元细胞分离自脊椎背根神经节；感觉神经母细胞发出轴突，呈束状，左右对称地从神经管的背部进入，此时的脊神经节即改称为背根神经节。神经系统最基本的结构和功能单位是神经元，即神经细胞，其大小和外观在中枢神经系统中差异很大。但都具有胞体和树突、轴突。胞体又叫核周体，内含神经丝、微管、内质网、游离核糖体和一个有明显核仁的核。一些大神经元突起的粗面内质网可用Nissl染色显示，在光镜下是灰蓝色斑块状，称为尼氏小体。树突和轴突是神经元的突起，能在神经元之间传递电冲动，突起的大小和形态各不相同，很难用常规的显微镜鉴别。脊髓背根神经节是周围神经的主要传入神经元，是感觉信号传导的中继站。背根神经元细胞的获取较为困难，需要在尽可能短的时间内通过解剖显微镜获得一定量的背根神经节组织。神经组织体外培养方法是当代神经科学一项很有价值的研究手段，背根神经节富含周围神经系统感觉神经元，已广泛用于轴突的导向及再生、中枢及周围神经系统的髓鞘形成、神经营养因子作用及受体分布、神经细胞衰老机制、基因治疗、组织工程等神经科学的研究。
产品属性
产品名称 小鼠背根神经元细胞
组织来源 脊髓组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）
培养基： 小鼠背根神经元细胞完全培养基(含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 神经元细胞样
传代比例： 不传代
传代特性： 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群
消化液： 0.125%胰蛋白酶
小鼠背根神经元细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的小鼠背根神经元细胞经β-Tubulin-Ⅲ免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的小鼠背根神经元细胞采用胶原酶-胰酶联合消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
步骤一：极致无菌环境搭建 提前40分钟对生物安全柜、实验耗材、试剂进行全面紫外灭菌，神经元细胞为终末分化细胞，无增殖能力、极易凋亡，需最高标准无菌环境。操作人员严格无菌防护，手部、器械全程酒精消毒。提前预热神经元专用无血清培养基、无菌PBS、专用温和消化液，排查试剂无任何污染、变质，保证培养环境零干扰。
步骤二：超温和解冻复苏 取出冻存背根神经元细胞，37℃水浴极轻柔晃动解冻，严格控制解冻时间≤1分钟，仅留微量冰晶立即取出，杜绝任何高温、长时间水浴损伤神经元结构。消毒冻存管外壁后，无菌缓慢转移细胞悬液至预热完全培养基中，几乎无力度轻柔混匀，最大程度保护脆弱神经元细胞。
步骤三：超低速离心纯化 设置离心机室温180g、8分钟，采用最低离心参数，避免神经元细胞破损、凋亡。离心后极其缓慢吸弃上清废液，精准保留完整细胞沉淀，加入预热无菌PBS缓冲液温和重悬，再次同等参数离心清洗，彻底去除残留杂质，留存高活性神经元细胞。
步骤四：极低密度接种 吸净PBS废液，加入神经元专用完全培养基，轻柔吹打制备单细胞悬液，计数后调整细胞密度至6×10⁴个/mL，极低密度接种可减少细胞间相互挤压，降低凋亡概率。接种后缓慢晃动培养瓶，使细胞均匀分散，为神经元突触生长、形态维持提供充足空间。
步骤五：长时稳定静置培养 将培养瓶放入37℃、5%CO₂、饱和湿度培养箱静置培养48小时，全程严禁开盖、挪动、扰动。小鼠背根神经元细胞复苏后极易凋亡，长时间稳定环境可有效促进细胞贴壁、存活，启动突触伸展生长。
步骤六：超轻柔低频换液 培养48小时后进行首次微量换液，仅缓慢吸取1/2陈旧培养基，补充等量新鲜预热培养基，不彻底换液，保留部分原有细胞培养液，维持神经元生长微环境稳定。后续每96小时半量换液一次，杜绝彻底换液导致的环境骤变引发细胞凋亡。
步骤七：状态监测与保活培养 神经元细胞无增殖能力，无需常规传代，核心以保活、维持形态为主。每日显微镜观察细胞存活状态、突触生长情况，及时剔除凋亡细胞，严格把控培养箱环境参数，杜绝任何环境波动，持续维持神经元细胞正常形态与生理活性，用于后续实验检测。
