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兔主动脉平滑肌细胞

兔主动脉平滑肌细胞

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产品概述 product description

兔主动脉平滑肌细胞分离自主动脉组织;主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为:升主动脉起于左心室,至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓,弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉;在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉,以上为胸主动脉,至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉;髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。主动脉平滑肌细胞在心血管疾病发生、发展中具有重要作用,以主动脉平滑肌细胞为实验研究对象,探讨心血管疾病相关发病机制是目前研究的热点;体外培养的主动脉平滑肌细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。

产品属性

产品名称 兔主动脉平滑肌细胞

组织来源 主动脉组织

默认种属 新西兰大白兔,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基:  兔主动脉平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 每2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 成纤维细胞样

传代比例: 1:2

传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳

消化液: 0.25%胰蛋白酶

兔主动脉平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的兔主动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的兔主动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

1. 细胞复苏:取出冻存兔主动脉平滑肌细胞冻存管,37℃水浴快速融化冻存液,留有微小冰晶取出冻存管,酒精擦拭管壁消毒,移入安全柜,将细胞悬液缓慢转移至平滑肌细胞完全培养基的离心管。

2. 离心去除冻存保护剂:离心管配平,1000rpm 离心 5min,离心结束,小心吸弃上层冻存上清液,保留完整管底细胞沉淀。

3. 重悬离散细胞沉淀:加入预热兔主动脉平滑肌细胞完全培养基,轻柔反复吹打管底沉淀,打散细胞团块,制备均匀单细胞悬液。

4. 计数接种培养瓶:活细胞计数,按照血管平滑肌细胞标准接种密度接种,接种完毕十字轻晃培养瓶,细胞均匀铺展瓶底。

5. 培养箱静置贴壁孵育:培养瓶置于 37℃、5% CO₂饱和湿度细胞培养箱,静置孵育 24h,减少移动,保证平滑肌细胞充分贴壁。

6. 初次换液清除悬浮杂质:24h 后显微镜镜检贴壁状态,弃除旧培养基,清除悬浮死细胞碎片,补入预热新鲜完全培养基放回培养箱。

7. 常规培养传代实验:间隔 2‑3 天更换新鲜培养基,观察纺锤形平滑肌细胞形态,汇合度 80‑85% 消化传代,用于动脉粥样硬化、血管重构体外研究。