兔终板软骨细胞分离自椎间盘终板软骨组织;椎体终板是椎体在生长发育过程中,椎体上下面的骨骺板骨化停止后形成骨板,呈轻度凹陷,即为骨性终板。椎体终板的中央仍为一薄层透明软骨覆盖,并终生存在,即为软骨终板,上下软骨终板与髓核和纤维环连接共同构成椎间盘。椎体终板构成了椎间盘的上下边界,位于椎体中心的松质骨和椎间盘之间。是由软骨下骨和厚度相当的覆盖其上的软骨组成。主要作用是防止椎间盘髓核组织嵌入椎体,同时具有平衡分散应力的作用。成熟的终板软骨细胞多2-8个成群分布于软骨陷窝内,这些终板软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成,称为同源细胞群。电镜下,终板软骨细胞有突起和皱褶,细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中,终板软骨细胞收缩为不规则形,在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的终板软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
产品属性
产品名称 兔终板软骨细胞
组织来源 椎间盘组织
默认种属 新西兰大白兔,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 兔终板软骨细胞完全培养基(基础培养基,含FBS、EGF、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每3-4天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 梭形、多角形
传代比例: 1:2
传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
兔终板软骨细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔终板软骨细胞经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔终板软骨细胞采用胶原酶-中性蛋白酶联合消化并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
1. 细胞复苏:取出冻存兔终板软骨细胞冻存管,37℃水浴快速融化冻存液,残余微小冰晶取出冻存管,酒精擦拭管壁消毒,移入安全柜,将细胞悬液缓慢加入软骨细胞完全培养基的离心管。
2. 离心去除冻存保护试剂:离心管配平,1000rpm 离心 5min,离心结束,小心吸弃上层冻存上清液,软骨细胞沉淀容易松散,操作力度放缓。
3. 轻柔重悬细胞沉淀:加入预热兔终板软骨细胞完全培养基,温和吹打管底沉淀,打散细胞团,制备单细胞悬液,软骨细胞机械耐受差,禁止大力吹打。
4. 计数接种培养器皿:活细胞计数,按照软骨细胞适宜接种密度接种培养瓶,接种后十字轻晃培养瓶,细胞均匀铺于瓶底。
5. 培养箱静置贴壁孵育:培养瓶放置 37℃、5% CO₂饱和湿度细胞培养箱,静置孵育 24h,减少移动,保障软骨细胞贴壁。
6. 初次换液清除悬浮碎片:24h 后显微镜观察贴壁状态,弃除旧培养基,清除悬浮死细胞碎片,补入预热新鲜完全培养基放回培养箱。
7. 维持培养传代实验:每 2‑3 天更换新鲜培养基,观察软骨细胞形态,汇合度 80%‑85% 消化传代,用于脊柱终板退变相关体外模型。
