兔直肠平滑肌细胞分离自直肠组织；直肠为大肠的未段，位于小骨盆内。上端平第3骶椎处接续乙状结肠，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿过盆膈，下端以肛门而终。直肠上端的大小似结肠，其下端扩大成直肠壶腹，是粪便排出前的暂存部位，最下端变细接肛管。直肠在盆腔内的位置与骶椎腹面关系密切，与骶椎有相同的曲度。直肠周围多脂肪、无纵带，位于膀胱和生殖器官的背侧。直肠平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。直肠的动脉血供主要是来自肠系膜下动脉的直肠上动脉，来自髂内动脉的直肠中动脉和来自髂内动脉的直肠下动脉。平滑肌收缩是胃肠蠕动中基本的运动方式；肠炎时由于平滑肌特殊肌动蛋白的增加导致了平滑肌层的增厚。平滑肌肌动蛋白可能影响收缩力的产生，这进一步证明了炎症时的肠平滑肌细胞具有可塑性。利用肠平滑肌细胞的培养，可以帮助了解收缩、增殖和胃肠道结缔组织对平滑肌细胞的反应。
产品属性
产品名称 兔直肠平滑肌细胞
组织来源 直肠组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 兔直肠平滑肌细胞完全培养基(基础培养基，含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔直肠平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔直肠平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔直肠平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
1. 细胞复苏：取出冻存兔直肠平滑肌细胞冻存管，37℃水浴快速融化冻存样本，留有少量冰晶取出，酒精消毒管壁，移入生物安全柜，细胞悬液缓慢滴入平滑肌细胞完全培养基的离心管。
2. 离心去除冻存保护剂：离心管配平，1000rpm 离心 5min，离心结束，轻柔吸弃上层冻存上清液，避免触碰管底细胞沉淀。
3. 温和重悬细胞沉淀：加入预热兔直肠平滑肌细胞完全培养基，轻柔吹打管底沉淀，打散细胞团块，制备单细胞悬液，减少机械剪切损伤。
4. 计数接种铺瓶：活细胞计数，按照平滑肌细胞推荐接种密度接种培养瓶，接种完成十字晃动培养瓶，细胞均匀分布瓶底。
5. 培养箱静置贴壁孵育：培养瓶放入 37℃、5% CO₂饱和湿度细胞培养箱，静置孵育 24h，期间不要挪动培养瓶，保证平滑肌细胞贴壁。
6. 首次换液清除悬浮死细胞：孵育 24h 后显微镜镜检贴壁，弃旧培养基，去除悬浮死亡细胞碎片，添加预热新鲜完全培养基放回培养箱。
7. 常规培养传代使用：间隔 2‑3 天更换培养基，观察长梭形平滑肌细胞形态，汇合度 80‑85% 消化传代，用于肠道平滑肌相关体外研究。
