兔脂肪间充质干细胞分离自脂肪组织;脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成,聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶;贮存的脂肪,在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸,经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应,参与多种重要病理生理过程;脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的内分泌系统。脂肪组织中也存在一些干细胞群,具有自我更新能力和多向分化潜能,被称为脂肪组织来源的间充质干细胞,简称脂肪间充质干细胞。与骨髓间充质干细胞相比,在来源、细胞群特点以及分化潜能等多方面极为相似。但是,脂肪间充质干细胞更易获得足够数量的细胞,且获取过程中对机体损伤更小,是更为理想的自体干细胞源。脂肪组织分离得到脂肪间充质干细胞以梭形为主要形态,BrdU可标记其细胞核。
产品属性
产品名称 兔脂肪间充质干细胞
简称 ADSCs;ADMSCs
组织来源 脂肪组织
默认种属 新西兰大白兔,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 兔脂肪间充质干细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
兔脂肪间充质干细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔脂肪间充质干细胞经CD90免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔脂肪间充质干细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
1. 细胞复苏:取出冻存兔脂肪间充质干细胞冻存管,37℃水浴快速融化冻存液,少量冰晶留存即取出冻存管,酒精擦拭管壁,安全柜中将细胞悬液缓慢转移至装有间充质干细胞完全培养基的离心管。
2. 离心去除冻存保护剂:离心管配平,1000rpm 离心 5min,离心完成,小心吸弃上层冻存上清液,不要扰动管底间充质干细胞沉淀。
3. 重悬离散细胞沉淀:加入预热兔脂肪间充质干细胞完全培养基,轻柔吹打管底沉淀,打散细胞团聚物,制备均一的单细胞悬液。
4. 计数接种培养瓶:活细胞计数,按照间充质干细胞标准接种密度接种,接种完毕十字轻晃培养瓶,使细胞均匀铺展瓶底。
5. 培养箱静置孵育贴壁:将培养瓶平稳放置 37℃、5% CO₂饱和湿度细胞培养箱,静置孵育 24h,减少移动,保障干细胞贴壁伸展。
6. 初次换液清除碎片杂质:24h 后镜检细胞贴壁状态,弃除旧培养基,清除悬浮死细胞,补入预热新鲜完全培养基放回培养箱。
7. 扩增培养与功能实验:每 2‑3 天更换新鲜培养基,细胞汇合 80‑85% 进行胰酶消化传代,可开展多向分化、组织修复相关体外实验。
