兔支气管平滑肌细胞分离自支气管组织；支气管（Bronchi），是指由支气管分出的各级分枝，由支气管分出的一级支气管，即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较，前者较细长，走向倾斜；后者较粗短，走向较前者略直，所以经支气管堕入的异物多进入右主支气管。支气管和支气管还有以区别就是，支气管是以“C”型的支气管软骨为支架，而支气管不是。支气管平滑肌细胞主要功能：①支气管平滑肌细胞能维持支气管张力，保持支气管形态；②支气管平滑肌特异的超微结构特点和调节机制是支气管正常生理功能的基础；③支气管平滑肌通过分泌细胞因子和趋化因子等促炎介质，发挥免疫调节功能。支气管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
产品属性
产品名称 兔支气管平滑肌细胞
简称 TSMCs
组织来源 支气管组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 兔支气管平滑肌细胞完全培养基(基础培养基，含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔支气管平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔支气管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔支气管平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
1. 细胞复苏：取出冻存兔支气管平滑肌细胞冻存管，37℃水浴快速融化冻存样本，留有少量冰晶取出，酒精擦拭管壁，安全柜中将细胞悬液缓慢加入平滑肌细胞完全培养基的离心管。
2. 离心去除冻存保护剂：离心管配平，1000rpm 离心 5min，离心结束，小心吸弃上清冻存液，不要扰动管底细胞沉淀。
3. 轻柔重悬细胞沉淀：加入预热兔支气管平滑肌细胞完全培养基，温和吹打管底沉淀，打散细胞团，制备单细胞悬液，平滑肌细胞避免剧烈吹打。
4. 计数接种培养器皿：活细胞计数，按照平滑肌细胞推荐密度接种培养瓶，接种后十字轻晃培养瓶，细胞均匀分布瓶底。
5. 培养箱静置贴壁孵育：培养瓶放入 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，静置孵育 24h，减少挪动，保证平滑肌细胞充分贴壁。
6. 初次换液去除悬浮杂质：24h 后显微镜观察贴壁状态，弃旧培养基，清除悬浮死细胞碎片，添加预热新鲜完全培养基放回培养箱。
7. 维持培养传代实验：2‑3 天更换一次培养基，观察长梭形平滑肌细胞形态，汇合度 80‑85% 消化传代，用于气道收缩、气道重塑相关体外研究。
