兔支气管成纤维细胞分离自支气管组织；支气管（Bronchi），是指由气管分出的各级分枝，由气管分出的一级支气管，即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较，前者较细长，走向倾斜；后者较粗短，走向较前者略直，所以经气管堕入的异物多进入右主支气管。支气管和气管还有以区别就是，气管是以“C”型的气管软骨为支架，而支气管不是。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的支气管成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6 h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。支气管成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持组织的正常形态，合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
产品属性
产品名称 兔支气管成纤维细胞
组织来源 支气管组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 兔支气管成纤维细胞完全培养基(基础培养基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔支气管成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔支气管成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔支气管成纤维细胞采用胶原酶-胰酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
1. 细胞复苏：取出冻存兔支气管成纤维细胞冻存管，置于 37℃水浴快速融化冻存液，剩余微小冰晶取出冻存管，酒精擦拭管壁消毒，移入安全柜，将细胞悬液缓慢转移至含有完全培养基的离心管。
2. 离心去除冻存保护液：离心管配平，1000rpm 离心 5min，离心完成，吸弃上层冻存上清液，保留管底完整细胞沉淀。
3. 重悬离散细胞沉淀：加入预热兔支气管成纤维细胞完全培养基，轻柔反复吹打管底沉淀，打散细胞聚集体，制备均匀单细胞悬液。
4. 计数接种铺瓶：活细胞计数，按照推荐接种密度接种细胞培养瓶，接种完毕十字晃动培养瓶，使细胞均匀铺展瓶底，防止局部高密度堆积。
5. 培养箱静置贴壁孵育：将培养瓶平稳放入 37℃、5% CO₂饱和湿度细胞培养箱，静置孵育 24h，不随意移动培养瓶，保障细胞贴壁伸展。
6. 首次换液清除死细胞碎片：孵育 24h 后镜检细胞贴壁，弃除旧培养基，去除悬浮死亡细胞，补入预热新鲜完全培养基放回培养箱。
7. 常规培养传代使用：每 2‑3 天更换新鲜培养基，观察梭形成纤维细胞形态，细胞汇合 80‑85%，进行胰酶消化传代，用于气道纤维化相关体外实验。
