兔羊膜上皮细胞分离自胎盘组织；胎盘（placenta）是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官，由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育，依靠胎盘从母体取得营养，而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素，是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代，胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合，以达到母子间物质的交换，这样的结构称假胎盘。羊膜是胎盘的最内层，与眼结膜组织结构相似，含有眼表上皮细胞，包括结膜细胞和角膜上皮细胞生长所需要的物质，其光滑，无血管、神经及淋巴，具有一定的弹性；在电镜下，其分为五层：上皮层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层，羊膜基底膜和羊膜羊膜基质层含有大量不同的胶元，主要为Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型胶原和纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成份。羊膜细胞主要由羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞组成，均具有多分化潜能，可转化为神经元，且还有合成、释放生物活性物质和神经营养因子的功能。
产品属性
产品名称 兔羊膜上皮细胞
组织来源 胎盘组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： 鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）
培养基： 兔羊膜上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 上皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔羊膜上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔羊膜上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔羊膜上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
1. 细胞复苏：取出冻存兔羊膜上皮细胞冻存管，37℃水浴快速融化冻存样本，残余少量冰晶就取出冻存管，酒精消毒管壁，安全柜中将细胞悬液缓慢加入含上皮细胞完全培养基的离心管稀释。
2. 离心去除冻存保护剂：离心管配平，1000rpm 离心 5min，离心结束，小心吸除上清冻存液，上皮细胞沉淀松散，吸上清时靠近液面，不要触碰底部沉淀。
3. 温和重悬细胞沉淀：加入预热兔羊膜上皮细胞专用完全培养基，轻柔吹打沉淀，打散细胞团，制备单细胞悬液，上皮细胞对机械剪切敏感，吹打动作放缓。
4. 计数接种铺板：进行活细胞计数，按照上皮细胞适宜接种密度接种培养瓶，接种完成后十字晃动培养瓶，使细胞均匀分布培养底面。
5. 培养箱静置贴壁：将培养瓶平稳放入 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，静置孵育 24h，不移动培养器皿，保障上皮细胞完成贴壁。
6. 初次换液去除悬浮碎片：孵育 24h 后镜检，弃旧培养基，去除悬浮死细胞，添加预热新鲜完全培养基，放回培养箱继续扩增。
7. 维持培养与传代：后续每 2‑3 天更换培养基，观察多边形上皮细胞形态，细胞汇合度达到 80%‑85%，进行胰酶消化传代，用于上皮功能相关体外实验。
