兔胚胎羊膜细胞分离自羊膜组织；羊膜为单层上皮细胞互相连接构成的薄膜。单层上皮细胞具有分泌羊水的作用。随着胚胎的生长发育，羊膜与绒毛密切紧贴，形成胎膜。胎膜随着羊膜腔逐渐扩大而呈半透明的薄膜，无血管，富有韧性（胎膜也就是羊膜腔的囊壁）。羊膜腔内充满的液体为羊水。羊膜仅覆盖在胎盘的儿体面，并不深入胎盘组织中，随着妊娠的进展羊膜腔逐渐扩大，占据整个子宫腔，羊膜是胎膜最内一层，是一层半透明的薄膜，与覆盖在胎盘、脐带的羊膜层相连接。羊膜是胎盘的最内层，与人眼结膜组织结构相似，含有眼表上皮细胞，包括结膜细胞和角膜上皮细胞生长所需要的物质，其光滑，无血管、神经及淋巴，具有一定的弹性，厚0.02-0.5 mm，在电镜下，其分为五层：上皮层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层，羊膜基底膜和羊膜基质层含有大量不同的胶元，主要为i、iii、iv、v、vii型胶原和纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成份，正是这些成份使羊膜可以充当“移植的基底膜”而发挥一种新的健康合适的基质。羊膜细胞主要由羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞组成，均具有多分化潜能，可转化为神经元，且还有合成、释放生物活性物质和神经营养因子的功能。
产品属性
产品名称 兔羊膜胚胎细胞
组织来源 羊膜组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）
培养基： 兔羊膜胚胎细胞专用培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3-5代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔羊膜胚胎细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔羊膜胚胎细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔羊膜胚胎细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
1. 细胞复苏：取出冻存兔羊膜胚胎细胞冻存管，置于 37℃水浴快速融化，仅剩微小冰晶时取出，75% 酒精擦拭管壁，移入生物安全柜，将细胞悬液缓慢转移至含完全培养基的无菌离心管。
2. 离心去除冻存保护液：离心管配平，1000rpm 离心 5min，离心结束，缓慢吸弃上层上清液，操作过程避免吸走管底脆弱的胚胎来源细胞沉淀。
3. 轻柔重悬细胞沉淀：加入预热兔羊膜胚胎细胞完全培养基，低力度反复吹打管底沉淀，打散细胞团块，制备单细胞悬液，胚胎类细胞比较脆弱，严禁暴力吹打。
4. 细胞计数与接种：完成活细胞计数，按照说明书推荐接种密度接种至培养瓶，接种结束后十字方向轻晃培养瓶，让细胞均匀铺于瓶底，防止局部密度过高。
5. 静置孵育贴壁生长：将培养瓶放入 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，静置孵育 24h，全程减少移动，降低对胚胎细胞贴壁的干扰。
6. 首次换液清除死细胞：孵育 24h 后显微镜观察贴壁情况，移除旧培养基，去除悬浮死亡细胞碎片，加入预热新鲜完全培养基，放回培养箱。
7. 常规培养与传代应用：每隔 2‑3 天更换新鲜培养基，持续观察细胞形态，细胞汇合度 80% 左右即可进行传代扩增，也可直接用于胚胎相关体外模型实验。
