兔牙周膜成纤维细胞分离自牙周膜组织；牙周膜（牙周韧带、牙周间隙）是由致密结缔组织所构成。多数纤维排列成束，纤维的一端埋于牙骨质内，另一端则埋于牙槽窝骨壁里，使牙齿固位于牙槽窝内；牙周膜内有神经、血管、淋巴和上皮细胞等。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的牙周膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6 h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。牙周膜成纤维细胞（PLFs）作为牙周膜的主体细胞，是牙周膜主要的间质细胞，它不仅具有合成胶原、基质、弹力纤维和糖蛋白的功能，还有吸收胶原吞噬异物的能力，还参与了牙周组织的病变、修复及再生过程。现在，利用牙周膜细胞建立体外模型，已经成为有关员研究牙周组织疾病的重要手段。
产品属性
产品名称 兔牙周膜成纤维细胞
简称 PDLFs
组织来源 牙周膜组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 兔牙周膜成纤维细胞完全培养基(基础培养基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔牙周膜成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔牙周膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔牙周膜成纤维细胞采用胶原酶-胰蛋白酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
1. 细胞复苏：取出冻存兔牙周膜成纤维细胞冻存管，迅速置于 37℃水浴快速融化，不断轻晃冻存管，剩余微小冰晶即刻取出，酒精擦拭管壁消毒后移入安全柜，把细胞悬液缓慢转移至含有完全培养基的无菌离心管内。
2. 离心清除冻存液：离心管配平，1000rpm 离心 5min，离心结束后，缓慢吸取丢弃上层冻存上清，动作轻柔，防止吸走管底松散的细胞沉淀。
3. 细胞重悬制备悬液：加入预热的兔牙周膜成纤维细胞完全培养基，使用移液管轻柔吹打管底沉淀，充分打散团聚细胞，制成分散良好单细胞悬液，禁止剧烈吹打剪切细胞。
4. 定量接种培养器皿：对单细胞悬液进行细胞计数，按照该细胞推荐接种密度接种于培养瓶，接种完毕后，平缓十字晃动培养瓶，让细胞均匀铺在瓶底，避免细胞集中在局部区域。
5. 培养箱静置贴壁：把培养瓶平稳放入 37℃，5% CO₂饱和湿度细胞培养箱，静置孵育 24h，此阶段禁止移动摇晃培养瓶，保障细胞充分贴壁伸展。
6. 首次换液清除碎片：孵育 24h 后取出，倒置显微镜观察贴壁情况，吸净旧培养基，去除悬浮死细胞与碎片，补入预热新鲜完全培养基，放回培养箱继续培养。
7. 常规培养与传代触发：之后间隔 2‑3 天更换新鲜培养基，持续观察细胞梭形成纤维形态，细胞汇合至 80‑85%，即可进行消化传代，也可直接用于牙周相关体外功能实验。
