兔胸腺上皮细胞分离自胸腺组织;胸腺是机体重要的淋巴器官,其功能与免疫紧密相关,是T细胞分化、发育、成熟的场所,还可以分泌胸腺激素及激素类物质,具有内分泌技能的器官。胸腺上皮细胞和胸腺细胞是胸腺微环境的重要组成部分,其外,胸腺上皮细胞组成了胸腺细胞不同发育阶段的三维结构,根据其在胸腺中位置不同,可分为皮质胸腺上皮细胞和髓质胸腺上皮细胞。胸腺细胞的发育和成熟是通过在胸腺皮质和髓质上皮细胞的迁移过程中相互作用完成的。此外,胸腺细胞通过皮质胸腺上皮细胞介导的阳性选择和髓质胸腺上皮细胞介导的阴性选择发育为能够识别和耐受自身主要组织相容复合体和自身抗原的成熟T淋巴细胞。胸腺上皮细胞是构成胸腺微环境的主要成份,其形态、分布和功能多样。表面抗原表达具有高度异质性,与胸腺细胞结合成不同类型复合体,部分胸腺上皮细胞相互排列构成囊泡样结构。电镜观察,可把胸腺上皮细胞分为3-6型,用抗胸腺上皮细胞单克隆抗体荧光染色可把胸腺上皮细胞分为9种类型。
产品属性
产品名称 兔胸腺上皮细胞
组织来源 胸腺组织
默认种属 新西兰大白兔,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²)
培养基: 兔胸腺上皮细胞完全培养基(基础培养基,含FBS、EGF、Hydrocortisone、肾上腺素、甲状腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 上皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1-2代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
兔胸腺上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确ᡟ餤ᡟ
质量检测
实验室分离的兔胸腺上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔胸腺上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
步骤一:胸腺组织无菌取材修剪 无菌条件下快速摘取兔新鲜胸腺组织,放入预冷无菌PBS缓冲液中反复冲洗,清除血迹、筋膜与杂质,剔除胸腺脂肪、结缔组织与坏死组织,将纯净胸腺组织修剪为1mm³细小组织碎块,全程低温无菌操作。
步骤二:胸腺组织酶解消化 加入预热的0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液,完全浸没胸腺组织碎块,37℃水浴恒温消化12分钟,每隔4分钟轻柔摇匀一次,促进组织解离,释放胸腺上皮细胞。
步骤三:终止消化与过滤除渣 消化完成后立即加入含血清完全培养基终止酶活性,轻柔吹打混合液使细胞分散,经200目细胞筛过滤,去除未消化组织残渣,收集胸腺上皮细胞悬液。
步骤四:离心洗涤纯化细胞 1200rpm离心6分钟,弃上清液,保留细胞沉淀。无菌PBS轻柔重悬洗涤2次,彻底清除消化液残留、淋巴细胞杂质与组织碎片,纯化上皮细胞。
步骤五:活细胞计数与浓度调整 胸腺上皮细胞专用培养基重悬细胞,制备单细胞悬液,台盼蓝染色计数活细胞,将细胞浓度调整至7×10⁵个/mL,适配上皮细胞贴壁增殖特性。
步骤六:规范接种均匀铺板 将细胞悬液接种至无菌培养皿中,轻轻十字晃动铺匀,保证细胞均匀贴壁生长,清晰标注细胞批次、接种时间与培养条件。
步骤七:恒温培养与定期养护 置于37℃、5%CO₂培养箱静置培养24小时,贴壁完成后更换新鲜培养基,去除漂浮死细胞与杂质。后续每48小时换液一次,每日观察上皮细胞形态、增殖融合状态,及时排查污染异常。
