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兔心脏微血管周细胞

兔心脏微血管周细胞

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产品概述 product description

兔心脏微血管周细胞分离自心脏组织;心脏是脊椎动物身体中最重要的一个器官,主要功能是为血液流动提供压力,把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成,左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开,故互不相通,心房与心室之间有瓣膜(房室瓣),这些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动,向器官、组织提供充足的血流量,以供应氧和各种营养物质,并带走代谢的终产物(如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等),使细胞维持正常的代谢和功能。心脏微血管内皮细胞是组成心脏微血管腔面单层扁平上皮样细胞,它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用,在心脏血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。近年来大量研究表明,心肌微血管周细胞的功能和病理改变直接影响心肌细胞功能,也是诸多毒素、炎症因子及病毒等重要靶位,其作为体外研究的细胞模型在心肌缺血-再灌注发病机制和细胞间旁分泌细胞生长因子研究中起着重要作用。

产品属性

产品名称 兔心脏微血管周细胞

组织来源 心脏组织

默认种属 新西兰大白兔,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)

培养基: 兔心脏微血管周细胞完全培养基(基础培养基,含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 成纤维细胞样

传代比例: 1:2

传代特性: 可传3-5代左右;3代以内状态最佳

消化液: 0.25%胰蛋白酶

兔心脏微血管周细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的兔心脏微血管周细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的兔心脏微血管周细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

步骤一:心脏微血管组织预处理 无菌摘取兔心肌微血管组织,预冷PBS反复冲洗干净血迹与杂质,剔除心肌细胞、血管内皮等杂组织,保留纯净微血管外周间质组织,修剪为细小碎块,全程低温无菌操作,保护周细胞活性。

步骤二:温和消化解离周细胞 加入预热的0.1%胰酶-胶原酶复合消化液,浸没微血管组织碎块,37℃恒温消化10分钟,轻柔摇晃容器,精准控制消化程度,解离血管外周周细胞,避免损伤细胞结构。

步骤三:终止消化与过滤收集 立即加入含血清完全培养基终止消化,轻柔吹打混合液使周细胞充分分散,经200目细胞筛过滤去除组织残渣,收集周细胞悬液。

步骤四:离心洗涤纯化细胞 1000rpm离心5分钟,弃上清杂质液,保留细胞沉淀。无菌预热PBS重悬洗涤2次,彻底清除消化液残留与组织碎片,提升周细胞纯度。

步骤五:计数与培养浓度校准 周细胞专用完全培养基重悬细胞,制备单细胞悬液,台盼蓝染色筛选活细胞,调整细胞悬液浓度至6×10⁵个/mL,适配心脏微血管周细胞的生长增殖特性。

步骤六:均匀接种贴壁培养 将调好浓度的细胞悬液接种至无菌培养瓶中,轻轻晃动均匀铺板,使细胞均匀贴壁分布,标注细胞信息、接种时间与培养参数。

步骤七:恒温养护与状态监测 放入37℃、5%CO₂培养箱静置培养24小时,细胞贴壁稳固后首次换液,后续每48小时更换新鲜培养基。每日观察周细胞形态、贴壁增殖状态,及时排查污染与细胞异常问题。