兔心脏微血管内皮细胞分离自心脏组织；心脏是脊椎动物身体中最重要的一个器官，主要功能是为血液流动提供压力，把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成，左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开，故互不相通，心房与心室之间有瓣膜（房室瓣），这些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动，向器官、组织提供充足的血流量，以供应氧和各种营养物质，并带走代谢的终产物（如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等），使细胞维持正常的代谢和功能。心脏微血管内皮细胞是组成心脏微血管腔面单层扁平上皮样细胞，它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用，在心脏血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。近年来大量研究表明，心肌微血管内皮细胞的功能和病理改变直接影响心肌细胞功能，也是诸多毒素、炎症因子及病毒等重要靶位，其作为体外研究的细胞模型在心肌缺血-再灌注发病机制和细胞间旁分泌细胞生长因子研究中起着重要作用。
产品属性
产品名称 兔心脏微血管内皮细胞
简称 CMEC;CMECs
组织来源 心脏组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）或明胶（0.1%）
培养基： 兔心脏微血管内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 内皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传2-3代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔心脏微血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔心脏微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔心脏微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
步骤一：心肌微血管组织无菌取材 无菌摘取兔心室心肌表层微血管组织，预冷无菌PBS反复冲洗，彻底清除血液、血栓与脂肪杂质，剔除粗大血管与心肌实质组织，保留细小心脏微血管网络，修剪为微小组织碎块，低温无菌保护内皮细胞活性。
步骤二：微血管组织特异性消化 加入预热的0.1%胶原酶消化液，完全浸没微血管组织，37℃恒温避光消化12分钟，轻柔摇匀，使消化液充分分解血管基质，解离微血管内皮细胞。
步骤三：终止消化与细胞收集 消化达标后立即加入内皮细胞专用完全培养基终止酶活性，轻柔吹打组织混合液，使内皮细胞充分脱落分散，过滤去除组织残渣，收集纯净细胞悬液。
步骤四：离心洗涤纯化细胞 1000rpm低速离心5分钟，弃上清去除消化液与杂质，保留细胞沉淀。无菌PBS轻柔重悬洗涤2次，彻底清除残留污染物，纯化心脏微血管内皮细胞。
步骤五：活性计数与浓度调整 专用培养基重悬细胞制备单细胞悬液，台盼蓝染色计数活细胞，统计存活率后将细胞浓度调整至7×10⁵个/mL，适配心脏微血管内皮细胞贴壁成管生长特性。
步骤六：包被培养接种铺板 将细胞悬液接种至明胶包被的无菌培养皿中，轻轻十字晃动均匀铺板，保障细胞均匀贴壁、生长稳定，规范标注实验相关信息。
步骤七：恒温培养与形态监测 置于37℃、5%CO₂培养箱静置培养24小时，完全贴壁后更换新鲜培养基，后续每48小时换液一次。每日观察细胞多边形形态、紧密连接与微血管结构形成状态，及时排查污染与生长异常。
