兔小气道平滑肌细胞分离自小气道组织；临床上通常将内径小于2 mm的小细支气管称为小气道。小气道具有气流阻力小，但易阻塞的特点。在平静吸气时，空气进入狭窄的鼻咽部，产生涡流。由于小气道已无软骨支持，在脱离纤维鞘嵌入肺组织后，管腔通畅性不象软骨性气道，易于受胸腔的压力变化的影响。小气道上皮细胞形成连续呼吸道内层，作为隔绝外界有害物质的物理和功能屏障发挥着独特的作用。小气道位于肺泡和气管的交界处，这些细胞在功能上能够调节免疫反应、产生化学因子进行宿主防御、表达粘附分子，并可能通过HLA-DR表达呈递抗原；它们还能产生液体有助于肺液的平衡。许多呼吸道疾病，如哮喘、支气管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纤维化，都涉及呼吸道表面上皮细胞的破坏；小气道上皮细胞的培养可为防止呼吸道扩增疾病和重塑提供新的治疗选择。小气道平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。小气道的生理功能特点：①小气道阻力小；②气流速度慢；③可调节控制通气与血流比例。小气管平滑肌细胞主要功能：①保持气道张力维持小气道形态；②肺小气道进行气体交换，病变可引起换气功能障碍；③炎症、痰液阻塞或当气道外压大于气道内压时容易造成小气道闭合、萎陷。小气管平滑肌细胞与主要病生理变化：①支气管炎；②肺气肿；③慢性阻塞性肺疾病。
产品属性
产品名称 兔小气道平滑肌细胞
组织来源 小气道组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 兔小气道平滑肌细胞完全培养基(基础培养基，含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔小气道平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔小气道平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔小气道平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
步骤一：气道组织无菌取材修剪 无菌条件下摘取兔肺组织末端小气道组织，放入预冷无菌PBS中反复冲洗，清除气道分泌物、淤血与杂质，剔除肺实质、血管及结缔组织，分离纯净小气道管壁平滑肌组织，修剪为细小组织碎块，全程低温无菌保护细胞活性。
步骤二：气道平滑肌组织消化 加入预热的0.2%胶原酶消化液，完全浸没小气道平滑肌组织碎块，37℃水浴恒温消化18分钟，每隔6分钟轻柔摇晃一次，充分解离平滑肌细胞与气道基质组织。
步骤三：终止消化与细胞收集 消化完成后加入含血清完全培养基终止酶活性，轻柔反复吹打组织混合液，使平滑肌细胞充分脱落分散，过滤去除未消化组织残渣，收集纯净细胞悬液。
步骤四：离心洗涤纯化细胞 细胞悬液1100rpm离心6分钟，弃上清杂质液，保留细胞沉淀。无菌预热PBS重悬洗涤2次，彻底清除消化液残留、组织碎片，获得高纯度小气道平滑肌细胞。
步骤五：活细胞计数与浓度调整 专用完全培养基重悬细胞，制备均匀单细胞悬液，台盼蓝染色筛选活细胞，精准计数后将细胞浓度调整至6×10⁵个/mL，适配小气道平滑肌细胞贴壁增殖特性。
步骤六：规范接种均匀铺板 将细胞悬液接种至无菌培养瓶中，轻轻十字晃动培养瓶，使细胞均匀分布贴壁，避免局部堆积，清晰标注细胞批次、接种时间与培养条件。
步骤七：恒温培养与周期养护 放入37℃、5%CO₂培养箱静置培养24小时，细胞贴壁稳固后更换新鲜培养基，后续每48小时换液一次。每日观察细胞梭形形态、增殖融合状态，及时排查污染与细胞异常凋亡问题。
