兔小肠隐窝上皮细胞分离自小肠组织；小肠位于腹中，上端接幽门与胃相通，下端通过阑门与大肠相连，是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内，上连胃幽门，下接盲肠，分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的，因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后，基本上完成了消化过程，同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞，粘膜有许多绒毛，绒毛根部的上皮下陷至固有层，形成管状的肠腺，其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切；构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似，接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似，绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短，不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能，其中以吸收和分泌功能为主。小肠腔面的环行皱襞从幽门附近开始出现，在十二指肠末段和空肠头段极发达，向下逐渐减少和变矮，至肠中段以下基本消失。粘膜表面还有许多细小的肠绒毛，是由上皮和固有层向肠腔突起而成，形状不一，以十二指肠和空肠头段最发达。绒毛于十二指肠呈叶状，于空肠呈指状，于回肠则细而短。环行皱襞和绒毛使小肠表面积扩大20-30倍，绒毛根部的上皮下隐至固有层形成管状的小肠腺，又称肠隐窝，故小肠腺与绒毛的上皮是连续的，小肠腺直接开口于肠腔。
产品属性
产品名称 兔小肠隐窝上皮细胞
组织来源 小肠组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： 鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）
培养基： 兔小肠隐窝上皮细胞完全培养基(基础培养基，含FBS、EGF、Hydrocortisone、肾上腺素、甲状腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 上皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔小肠隐窝上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养ᡟ餤ᡟ
质量检测
实验室分离的兔小肠隐窝上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔小肠隐窝上皮细胞采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
步骤一：小肠隐窝组织精准取材 无菌摘取兔新鲜小肠下段组织，预冷无菌PBS反复冲洗肠腔，清除内容物与黏液，纵向剪开肠壁，轻柔刮取小肠黏膜下层隐窝组织，剔除绒毛组织与肌肉组织，收集纯净隐窝组织，修剪为细小碎块，全程低温无菌操作。
步骤二：隐窝组织温和消化解离 加入预热的0.125%胰蛋白酶-EDTA消化液，浸没隐窝组织碎块，37℃恒温消化10分钟，期间轻柔摇匀，精准控制消化时间，充分解离隐窝上皮细胞，避免过度消化损伤干细胞活性。
步骤三：终止消化与过滤纯化 立即加入含血清完全培养基终止消化，轻柔吹打混合液使细胞分散，经200目无菌细胞筛过滤，去除隐窝组织残渣，收集纯净隐窝上皮细胞悬液。
步骤四：离心洗涤去除杂质 细胞悬液1200rpm离心6分钟，弃上清，保留细胞沉淀。无菌PBS轻柔重悬洗涤2次，彻底清除消化液残留、组织碎片与死细胞，纯化目标细胞。
步骤五：计数与培养浓度校准 隐窝上皮细胞专用培养基重悬细胞，制备单细胞悬液，台盼蓝染色计数活细胞，将细胞浓度调整至8×10⁵个/mL，适配隐窝细胞增殖、分化的特殊生长需求。
步骤六：均匀接种贴壁培养 将调好浓度的细胞悬液接种至无菌培养皿中，轻轻十字晃动铺匀，保证细胞均匀贴壁，为细胞增殖分化提供稳定环境，规范标注实验信息。
步骤七：恒温养护与动态观察 置于37℃、5%CO₂培养箱静置培养24小时，首次换液去除漂浮杂质，后续每48小时更换新鲜培养基。每日观察隐窝上皮细胞形态、增殖克隆形成状态，及时监测细胞生长活性与纯度。
