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兔小肠血管内皮细胞

兔小肠血管内皮细胞

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产品概述 product description

兔小肠血管内皮细胞分离自小肠组织;小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连,是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内,上连胃幽门,下接盲肠,分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的,因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后,基本上完成了消化过程,同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞,粘膜有许多绒毛,绒毛根部的上皮下陷至固有层,形成管状的肠腺,其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切;构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似,接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似,绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短,不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能,其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力,促使食物向下运动。血管内皮细胞除了吞噬异物、细菌、坏死和衰老的组织等,还参与集体免疫活动,包括:①血管收缩及血管舒张,从而控制血压;②凝血(血栓形成及纤维蛋白溶解);③动脉硬化;④血管生成;⑤炎症及肿胀(浮肿);⑥内皮细胞亦控制一些物质,如白血球进出血管。

产品属性

产品名称 兔小肠血管内皮细胞

组织来源 小肠组织

默认种属 新西兰大白兔,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)

培养基: 兔小肠血管内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 内皮细胞样

传代比例: 1:2

传代特性: 可传2-3代

消化液: 0.25%胰蛋白酶

兔小肠血管内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的兔小肠血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的兔小肠血管内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

步骤一:小肠微血管组织无菌取材 无菌条件下摘取兔小肠系膜微血管组织,放入预冷无菌PBS中反复冲洗,彻底清除血液、杂质与脂肪组织,剔除粗大血管,保留细小微血管网络组织,修剪为微小组织碎块,全程低温无菌保护内皮细胞活性。

步骤二:微血管组织特异性消化 加入预热的0.1%Ⅱ型胶原酶消化液,完全浸没微血管组织碎块,37℃恒温避光消化12分钟,轻柔晃动培养容器,使消化液充分作用于微血管壁,解离内皮细胞。

步骤三:终止消化与细胞收集 消化达标后立即加入血管内皮细胞专用完全培养基终止酶活性,轻柔吹打组织混合液,使内皮细胞充分脱落分散,转移混合液至无菌离心管中,收集全部细胞样本。

步骤四:离心洗涤纯化细胞 1000rpm低速离心5分钟,弃上清去除消化液与组织残渣,保留细胞沉淀。无菌PBS轻柔重悬洗涤2次,彻底清除残留杂质,获得高纯度小肠血管内皮细胞。

步骤五:活性检测与浓度调整 专用培养基重悬细胞制备单细胞悬液,台盼蓝染色计数活细胞,统计细胞存活率,将细胞悬液浓度调整至7×10⁵个/mL,适配微血管内皮细胞贴壁、成管生长特性。

步骤六:包被培养板接种铺板 将细胞悬液接种至明胶包被的无菌培养板中,轻轻晃动均匀铺板,保障细胞贴壁稳固、分布均匀,标注细胞信息与接种参数。

步骤七:恒温培养与形态监测 放入37℃、5%CO₂培养箱静置培养24小时,完全贴壁后更换新鲜培养基,后续每48小时换液一次。每日观察内皮细胞多边形形态、紧密连接及微血管结构形成状态,及时排查异常。