兔小肠黏膜上皮细胞分离自小肠组织；小肠位于腹中，上端接幽门与胃相通，下端通过阑门与大肠相连，是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内，上连胃幽门，下接盲肠，分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的，因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后，基本上完成了消化过程，同时营养物质被小肠黏膜吸收了。小肠管壁由黏膜、黏膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞，黏膜有许多绒毛，绒毛根部的上皮下陷至固有层，形成管状的肠腺，其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切；构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似，接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似，绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短，不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能，其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力，促使食物向下运动。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障，持续暴露于大量抗原中，也是机体面对病原微生物的第一道防线。因此，肠黏膜上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外，在黏膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为首先接触抗原的细胞，在黏膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用，它决定黏膜免疫反应的发生、性质和强度。
产品属性
产品名称 兔小肠黏膜上皮细胞
组织来源 小肠组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： 鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）
培养基： 兔小肠黏膜上皮细胞完全培养基(基础培养基，含FBS、EGF、Hydrocortisone、肾上腺素、甲状腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 上皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔小肠黏膜上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养ᡟ餤ᡟ
质量检测
实验室分离的兔小肠黏膜上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔小肠黏膜上皮细胞采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
步骤一：小肠组织无菌取材清洗 无菌条件下摘取兔新鲜小肠组织，快速放入预冷无菌PBS缓冲液中，反复冲洗小肠肠腔内壁，彻底清除肠道内容物、黏液与血迹，剔除肠壁外层肌肉、结缔组织，仅保留纯净小肠黏膜层组织，修剪为细小组织碎片。
步骤二：黏膜组织特异性消化 加入预热的0.15%胰蛋白酶-胶原酶复合消化液，完全浸没黏膜组织碎片，37℃恒温消化12分钟，每隔4分钟轻柔摇匀一次，促进消化液渗透黏膜组织，解离上皮细胞与基底组织，避免过度消化损伤细胞活性。
步骤三：终止消化与过滤收集 消化达标后立即加入含血清完全培养基终止酶活性，轻柔吹打混合液使细胞充分脱落分散，经200目无菌细胞筛过滤，去除未消化黏膜组织残渣，收集纯净上皮细胞悬液。
步骤四：离心洗涤纯化细胞 细胞悬液1200rpm离心6分钟，弃去上清杂质液，保留细胞沉淀。加入无菌预热PBS轻柔重悬洗涤，重复离心洗涤2次，彻底清除消化液、肠道杂质与死细胞，提升细胞纯度。
步骤五：计数与培养浓度调整 用小肠黏膜上皮细胞专用完全培养基重悬细胞，制备单细胞悬液，台盼蓝染色计数活细胞，将细胞浓度调整至7×10⁵个/mL，适配上皮细胞贴壁增殖、形成黏膜屏障结构的生长特性。
步骤六：均匀接种贴壁培养 将调好浓度的细胞悬液接种至无菌培养皿中，轻轻十字晃动铺匀，保证细胞均匀贴壁生长，无局部堆积。标注细胞名称、取材时间、接种参数，规范实验记录。
步骤七：恒温养护与定期换液 放入37℃、5%CO₂培养箱静置培养24小时，待细胞完全贴壁伸展后更换新鲜培养基，去除漂浮杂质与死细胞。后续每48小时换液一次，每日观察细胞形态、贴壁融合状态，及时排查污染与生长异常。
