兔下颌骨成纤维细胞分离自下颌骨组织；下颌骨位于面下部，呈弓形，围成口腔的前壁和侧壁，是面部唯一能活动的骨骼；其水平部分为下颌体，其垂直部分为下颌支，表层为骨密质，内部为骨松质，与颞骨关节凹组成颞下颌关节。下颌体分内、外两面及上、下两缘。下颌支分两面、四缘及两突。下颌支与颞骨形成关节。该关节非常灵活，可做出包括咀嚼动作在内的多种动作下颌骨的骨小梁也顺应咀嚼肌的拉力和力传送的方向而排列，斜向上后排列成线形；下颌骨的骨质较致密，血供较差，除主要接受下齿槽动脉血供外，又接受来自骨表面黏骨膜动脉分支的血液供应。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6 h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
产品属性
产品名称 兔下颌骨成纤维细胞
组织来源 下颌骨组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 兔下颌骨成纤维细胞完全培养基(基础培养基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔下颌骨成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔下颌骨成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔下颌骨成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
步骤一：无菌取材与组织修剪 无菌操作摘取兔下颌骨周围新鲜结缔组织，迅速放入预冷无菌PBS中冲洗3次，彻底清除血迹、骨屑与杂质，剔除多余脂肪、血管及坏死组织。将纯净结缔组织修剪为0.5-1mm³的细小组织碎块，全程低温无菌操作，保留完整活性细胞组织。
步骤二：组织贴壁预处理 将修剪好的组织碎块均匀平铺于无菌培养瓶瓶底，块间距保持0.5cm左右，避免组织堆积重叠。轻轻翻转培养瓶，使瓶底朝上，置于培养箱静置30分钟，让组织块充分贴附于瓶壁，防止后续加液冲散组织。
步骤三：加液培养与组织活化 贴附完成后缓慢翻转培养瓶至正常状态，轻柔加入预热的下颌骨成纤维细胞专用完全培养基，完全浸没组织块，避免直接冲击组织。将培养瓶放入37℃、5%CO₂培养箱静置培养48小时，静置期间不移动、不晃动，促进细胞从组织块中爬出增殖。
步骤四：换液除杂纯化细胞 培养48小时后首次更换新鲜完全培养基，轻柔吸出旧培养基，去除漂浮组织残渣、死细胞与代谢杂质，补充等量新鲜预热培养基。继续静置培养，每日观察细胞爬出状态，待细胞从组织块周边均匀伸展生长。
步骤五：细胞消化传代预处理 当细胞融合度达到80%左右时，吸出旧培养基，无菌PBS轻柔洗涤瓶底2次，去除残留血清与杂质。加入适量0.125%胰蛋白酶消化液，覆盖瓶底细胞，37℃温和消化2分钟，观察细胞回缩、变圆后立即加入完全培养基终止消化。
步骤六：计数与密度校准接种 轻柔吹打瓶底细胞，制备均匀单细胞悬液，取样计数活细胞数量，调整细胞悬液浓度至6×10⁵个/mL，按照1:2传代比例接种至新的无菌培养瓶中，轻轻晃动均匀铺板。
步骤七：恒温增殖培养与监测 将新接种的培养瓶放回恒温培养箱，静置培养24小时待细胞贴壁稳固，后续每48小时换液一次，定期观察成纤维细胞梭形形态、增殖速度，及时处理污染、细胞老化等异常情况，维持细胞稳定增殖状态。
