兔胃黏膜上皮细胞分离自胃黏膜组织；胃黏膜柔软，活体呈橘红色。胃空虚时形成许多皱襞，充盈时变平坦。幽门处的黏膜形成环形皱襞，突向腔内称幽门瓣。胃黏膜可分为三层，即上皮层（单层柱状上皮）、固有层（由结缔组织构成、含有大量的胃腺）和黏膜肌层（为薄层平滑肌、排列成内环外纵）。胃黏膜上皮细胞源自胃黏膜的上皮层，细胞为单层柱状上皮，排列整齐，能分泌黏液覆盖于胃黏膜的表面，防止胃酸和胃蛋白酶对胃黏膜的损害。体外培养胃黏膜上皮细胞为研究细胞功能及致病因子、药物、激素对细胞的损伤、保护和功能调控提供了简单而优越的模型。
产品属性
产品名称 兔胃黏膜上皮细胞
组织来源 胃组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： 鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）
培养基： 兔胃黏膜上皮细胞完全培养基(基础培养基，含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 上皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔胃黏膜上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔胃黏膜上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔胃黏膜上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
步骤一：组织取材与无菌预处理 无菌条件下摘取兔胃黏膜新鲜组织，置于预冷无菌PBS缓冲液中，快速冲洗组织表面血迹、黏液与杂质，剔除黏膜下层结缔组织、脂肪组织，仅保留纯净胃黏膜上皮组织。将修剪后的组织剪成1mm³左右细小组织碎块，全程低温无菌操作，防止组织细胞坏死、污染。
步骤二：组织消化解离细胞 向组织碎块中加入预热的0.25%胰蛋白酶-胶原酶复合消化液，完全浸没组织块，置于37℃水浴恒温消化15分钟，每隔5分钟轻柔摇晃一次，促进消化液充分渗透。消化至组织松散、肉眼无明显块状组织时，加入含血清完全培养基终止消化，中和酶活性。
步骤三：过滤离心纯化细胞悬液 消化后的混合液经200目无菌细胞筛过滤，去除未消化完全的组织残渣，收集过滤后的细胞悬液。将悬液1200rpm离心6分钟，弃上清，保留管底细胞沉淀，加入无菌PBS轻柔重悬洗涤，重复离心洗涤2次，彻底清除消化液残留与组织杂质。
步骤四：细胞分散与活性筛选 洗涤完成后加入胃黏膜上皮细胞专用完全培养基，轻柔反复吹打细胞沉淀，制备均匀单细胞悬液，尽量减少细胞团聚结块。通过静置沉淀去除少量未分散组织，筛选活性良好的单细胞，保障后续培养纯度。
步骤五：精准计数与浓度调整 取样进行血球计数板计数，台盼蓝染色区分活死细胞，统计有效活细胞数量，根据上皮细胞生长特性，将细胞悬液浓度调整至7×10⁵个/mL，该浓度可保障细胞快速贴壁、增殖分化，避免密度异常导致的生长不良。
步骤六：接种铺板均匀培养 将调好浓度的细胞悬液接种至提前润洗的无菌培养皿中，轻轻十字晃动培养皿，使细胞均匀分布于皿底，无局部堆积空白。标注细胞名称、取材时间、接种参数，规范实验标识。
步骤七：恒温静置养护与换液 置于37℃、5%CO₂饱和湿度培养箱静置培养24小时，严禁移动培养皿，保障上皮细胞牢固贴壁。24小时后首次换液，去除漂浮死细胞与杂质，后续每48小时更换新鲜培养基，每日观察细胞形态、贴壁增殖状态，及时排查污染问题。
